酶的特性实验.doc

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1、酶的特性一、实验目的1.通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响二、实验原理本实验由温度对酶活力的影响;PH对酶活力的影响;酶的激活剂及抑制剂;酶的专一性4组实验组成。(一)温度对酶活力的影响酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-40℃,植物酶的最适温度为50-60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100℃,其活性并无明显的改变,但在100℃的溶液中却很快地完全失去活

2、性。低温能降低酶或抑制酶的活性,但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。(二)PH对酶活力的影响酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6.8。(三)唾液淀粉酶的活化及抑制酶的活性受活化剂或抑制剂的影响,氯离子为唾液淀粉酶的活化剂,铜离子为其抑制剂。

3、酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。(四)酶的专一性淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。三、实验物品仪器:试管及试管架,恒温水浴,冰浴,沸水浴,吸管,滴管,锥形瓶 药品: 稀释30倍的唾液(用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使其流入量筒并稀释30倍。混匀备用。)KI-I2碘溶液(将KI20g及I210g溶于100ml水中,使用前再稀释10倍。)0.2

4、molNa2HPO3溶液,1%NaCl溶液,1%CuSO4溶液,1%Na2SO4溶液,2%蔗糖溶液,0.1%淀粉溶液,溶于0.3%NaCl的1%淀粉溶液,溶于0.3%NaCl的0.2%淀粉淀粉溶液,溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液四、实验过程(一)温度对酶活力影响往三只试管各加入1.5ml0.2%淀粉的0.3%NaCl溶液,冰浴5min,再加入已冰浴5min的稀释唾液1ml,摇匀后,将1号试管继续冰浴、2号两试管放入37℃恒温水浴中,3号试管放入沸水浴中,10min后去处,将2号管内液体分为两半,

5、用KI-I2溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果,将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10min后,再用碘液实验,结果如何?管号12340.2%淀粉的0.3%NaCl溶液(ml)1.51.51.51.5冰浴5min稀释唾液(ml)(已冰浴5min)1111冰浴10min37℃恒温水浴10min沸水浴10min冰浴5min后转37℃恒温水浴10minKI-I2液1-2滴(二)PH对酶活力的影响取四个标有号码的50ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶

6、液和0.1柠檬酸溶液以制备pH5.0-8.0的四种缓冲液。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀,并依次置于37℃恒温水浴中保温。随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释200倍的唾液2ml,待向第4管加入唾液2ml后,每隔1分钟由第3管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1小滴KI-I2溶液。添加KI-I2溶液,检验淀粉的水解程度。待混合变为棕黄色后,向所有试管依次添加1-2滴KI-I2溶液。添加滴KI-I2溶液的时间间隔,从第1管起,亦均为1分钟。观察各试管中物质呈现的颜色

7、,分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。12340.2mol/lNa2HPO3溶液(ml)2.633.94.90.1mol/L柠檬酸溶液(ml)2.421.10.1PH55.86.880.5%淀粉的0.3%NaCl溶液(ml)2222稀释唾液(ml)2222混匀,于37℃恒温水浴中保温(三)唾液淀粉酶的活化及抑制往四只编好号的试管中各加入1.5ml的0.1%淀粉溶液,然后往1号试管加入0.5ml1%NaCl溶液,往2号试管加入0.5ml1%CuSO4溶液,往3号试管加入0.5ml1%1%Na2SO4溶液,往4

8、号试管加入0.5ml蒸馏水,于37℃恒温水浴中保温5分钟,然后加入2-3滴KI-I2溶液,观察实验现象,并分析酶的活化及抑制。管号12340.1%淀粉溶液(ml)1.51.51.51.5稀释的新鲜唾液(ml)0.50.50.50.51%NaCl溶液(ml)0.5--------------------1%CuSO4溶液(ml)-------0.5--------------1%Na2SO4溶液(ml)--------------0.5---

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