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时间:2018-01-23
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1、水产品中氯霉素残留测定方法的比较分析李晓川孔轶群 冷凯良 王联珠 李兆新 林 洪摘要氯霉素由于存在严重毒副作用,已被许多国家和地区列为禁用药物。水产品中氯霉素残留检测方法的检出限已成为国际贸易合作中新的技术性壁垒。本文分析比较了几种常用氯霉素残留的检测方法,并对其特点及检出限进行了概括性叙述。Analysisofdeterminationmethodsofchloramphenicolresiduesinaquaticproducts氯霉素(Chloramphenicol,CAP),是一种有效的广谱抗生素,常用于动物各种传染性疾病的治疗,对多种病原菌有较强的抑制作用,
2、曾在水产养殖业中得到广泛应用,同时也带来了水产品中氯霉素残留的严重问题。氯霉素存在严重的毒副作用,能抑制人体骨髓造血功能,引起人类的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症、新生儿、早产儿灰色综合症等疾病,低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性,因此动物食品中的氯霉素残留对人类的健康构成了巨大威胁(蒋定国2002;胡顶飞2001)。氯霉素残留问题已引起国际组织和世界上许多国家和地区的高度重视。欧盟、美国等均在法规中规定CAP残留限量标准为“零容许量”(Zerotolerance)(Georage 2002),即不得检出。我国是一个水产养殖大国,养殖规模不断扩大,但养殖过程中滥
3、用抗生素,已成为一个严重的水产品安全问题。自去年以来,我国出口水产品频频被进口国检出氯霉素残留。去年9月底,欧盟因氯霉素残留问题将中国产冻虾产品纳入其食品快速预警机制,又于今年初通过决议,自2月1日起全面暂停从中国进口动物制品;2002年1月,美国FDA也对我国虾产品发出预警通报;3月中旬,日本厚生省宣布对我国动物产品实施严格检查,并公布了包括氯霉素在内的11种药物的残留限量。今年1到6月,我国水产品对欧盟出口量、出口额比去年同期分别下降70.8%和73%。药物残留已成为扩大水产品国际贸易的主要障碍。针对这种情况,农业部已将氯霉素从2000年《中国兽药典》中删除,此药
4、重新进入安全评价体系,在《动物性食品兽药残留规定》中规定可食部分不得检出,并且在出口的日常检测中,将其列为必检项目,一旦发现超标,一律禁止出口。对于氯霉素残留,由于存在多种检测方法,因此各种方法的检出限问题已成为关注的焦点。发达国家对检出限的要求越来越严格。欧盟由原来的10μg/kg改为1μg/kg,继而又降至0.1μg/kg,比原标准要求提高了100倍;美国FDA规定的检出限也由原来的5μg/kg改为1μg/kg,即将降为0.3μg/kg,且目前正在研究应用更为灵敏的方法,可使检出限值达0.1μg/kg。水产品中氯霉素残留检测方法的检出限已在国际贸易合作中成为新的技
5、术性壁垒。为保障食用者的健康,应对技术壁垒,在全球性贸易竞争中立于不败之地,必须加强水产品中的药物残留监控检测工作,氯霉素即为其中的热点之一。近年来各种关于氯霉素残留的检测方法不断涌现,大致可分为三大类:第一类是生物测定法,第二类是化学分析法,第三类是兼有生物和化学的酶联免疫检测法。本文结合国内外的报道,对几种常用的氯霉素残留检测方法做了概括性叙述,并对其特点及检出限进行了分析比较。1 筛选检验方法在实际工作中,不可能也无必要对所有动物性水产品进行各种复杂、昂贵耗时的分析检测,为能快速确定动物食品中是否有氯霉素残留,通常做法是遵循一定程序,对被测产品进行取样,按规范要
6、求对样品进行筛选检验(Screeningmethod),对筛选为阳性的样品再用更精确的方法进行定量鉴定。1.1 微生物法在快速筛选检验程序中,微生物法非常有效,这类方法简单、费用少、速度快,因而广泛用于动物性食品兽药残留的初筛。1.1.1 棉签法棉签法(Swabtestonpremises,STOP),又称现场拭子法,是检测动物体中抗生素残留的现场试验方法。本法自1979年由美国农业部食品安全和检验署研究开发出以后,世界各国都普遍采用,目前在加拿大和美国,试剂已商品化,有药盒形式的商品出售(李诚1993)。该方法是用棉签(拭子)采取动物体内的组织液,然后将其放置于涂满
7、枯草杆菌的培养基中保温过夜。观察是否在拭子周围出现抑菌环,若有,即表明组织液中有抗生素存在。如果该动物仅用氯霉素进行过治疗,则可以认为该组织中存在氯霉素残留。梅先之(1997)用该法对鲤鱼体内氯霉素残留进行了研究。他采用枯草芽孢杆菌菌株配制芽孢悬浮液。将切碎鱼肉与不同浓度氯霉素标准液混合,用上述方法检测是否形成抑菌圈,结果表明最低检出限为1.00μg/g。此方法在几分钟内即可完成取样操作,16~18h即可获得结果,是简便易行而又有一定准确性的检测方法,比较适合基层现场筛选检测(宋华宾1993)。但是该检测法灵敏度较差,检出限较高,多在μg/g级,特异
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