lc-2010aht型高效液相色谱仪操作规程

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1、岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪操作规程目的：规范岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪的使用。范围：本规程适用于LC-2010AHT型高效液相色谱仪操作。所属部门：***。责任人：***。内容：1系统组成本系统由容器箱（放置储液瓶）、自动进样器、检测部、输液部、柱温箱、系统控制器、岛津液相色谱工作站（LCsolution工作站）、稳压器和电脑等组成。2准备   2.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气至少5min。   2.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。   2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），

2、用0.45μm滤膜过滤。   2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。3开机3.1接通电源，打开稳压器，按下系统控制器面板上的电源开关【on/off】，并同时打开与高效液相色谱仪连接的电脑。3.2待高效液相色谱仪自检完毕后，上托画面上显示要输入LoginPass-ID-No的对话框，输入00000后，按       [OK]       显示Menu画面，在按F5进入主菜单。双击桌面上【Lcsolution】,再点击对话框中的分析【仪器1】，即打开在线分析。　3.3色谱方法的建立在“在线分析”界面左上角文件项下点击新建方法文件，点击画面【高级

3、】，在此项下进行参数设定：3.3.1在【数据采集】处设置【采集时间】、【泵】处设置流速【Flow】和通道的选择并输入各通道的浓度【即A、B、C、D四个通道的比例3】及【最大压力】一般25Mpa。并可根据检测方法在【时间程序】项下设置梯度程序（具体操作详见LC-2010AHT操作说明书之梯度洗脱的设定）3.3.2【检测器】项下的【D2】处选择开或关【OFF/D2】；【波长选择】处设置检测波长；其他参数为系统默认。3.3.3【柱温箱】项下的【使用柱温箱】除打“√”，并根据方法设置具体温度（一般C18色谱柱柱温不宜超过40℃）。3.3.4【自动进样器】各参数为出厂前所

4、设置的固定参数。可以不用设置。3.3.5【自动排气】项下选择所需要排气的通道A、B、C、D及排气时间。所以参数设置完成后点击【下载】，弹出是否保存当前方法的对话框，点击“是”即将方法存入电脑（一般根据样品名称来命名方法文件）。（备注：在使用中泵通道时，如不设置，系统默认为A–通道）。4．数据采集方法建立完成后，用所需的流动相来平衡色谱柱（若流动相中有缓冲盐，用前需先用90%的水甲醇过柱30min，方可让流动相进入色谱柱）。待系统平衡好后，即可进行数据采集。4.1单次运行4.1.1待系统平衡好后，点击“在线分析”界面左侧“单次运行”，设置数据存入路径、样品名称及进

5、样量，点击“确定“，即开始数据采集。4.1.2数据采集完成后，打开“再解析”LCsolution工作站，进行数据处理。（具体详见LC-2010AHT数据处理说明书）4.2批处理4.2.1在系统平衡时，点击“在线分析”界面左侧【批处理】,在主菜单“文件”项下选择“新建批处理文件”，再点击【向导】，设置【方法文件】，选择瓶号、盘号及进样量，依次向下设置数据路径后，即得批处理文件。（批处理设置详见LC-2010AHT仪器操作说明书）4.2.2．待系统平衡好后，点击【批处理开始】运行批处理，即开始数据采集。（进行批处理采集时，可以在数据采集最后设置冲柱采集，并设置关机程

6、序）。4.2.3数据采集完成后，打开“再解析”LCsolution工作站3，进行数据处理。（具体详见LC-2010AHT数据处理说明书）5仪器的清洁5.1分析完毕之后，先关闭检测器，继续以工作流动相冲洗30分钟后（如流动相含缓冲盐或酸或碱，换为不含缓冲盐或酸或碱的同比例流动相在冲洗30分钟），再换用水-甲醇（90:10）冲洗系统及色谱柱至少60分钟［必要时再走40min的梯度（水冲90%冲到0）］，最后用甲醇或乙腈冲洗至少30分钟。（若为纯水色谱柱开始清洗色谱柱柱时可用100%水进行清洗，有机溶剂尽量用甲醇，一般冲洗色谱柱是泵流速为1.0ml/min）5.2冲洗

7、完毕后，将整个流路都置于有机溶剂中，再逐步降低流速至0，关闭电源开关，关闭稳压器。6仪器的维护与保养6.1靠仪器吃饭的人必须把仪器的维护作为每天的必修课。6.2如果流动相中含盐类，在换流动相前先用90％的水将保存在柱子内的有机溶剂冲洗掉（1.0ml/min，20～30min，此时氘灯先不要打开），再换流动相平衡柱子，以防盐析出将色谱柱堵塞。6.3水是导致仪器故障的主要杀手，每天使用时必须先过0.45μm滤膜；流动相亦必须先过0.45μm滤膜方可上机；样品进样前亦要先过0.45μm滤膜，尤其是中药样品。6.4每次开启泵时，应逐步升高流速至所需流速；关泵时亦逐步降低

8、流速至0。6.5每天使用