欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:6686573
大小:51.50 KB
页数:3页
时间:2018-01-22
《[生物医药论文精品]番石榴叶中人白细胞弹性蛋白酶抑制剂的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、番石榴叶中人白细胞弹性蛋白酶抑制剂的研究摘要目的研究番石榴叶中的人白细胞弹性蛋白酶(HLE)抑制剂成分。方法通过溶剂提取、聚酰胺、硅胶柱色谱、SephadexLH20柱色谱和HPLC制备等分离纯化,得到活性化合物,根据理化性质和光谱数据鉴定化学结构,应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型进行评价。结果从番石榴叶中分离到的活性成分为2α-羟基-3β-(反-桂皮酰基)-12-烯-28-羧基乌苏酸(I)和2α-羟基-3β-(顺-桂皮酰基)-12-烯-28-羧基乌苏酸(II)的混合物,对人白细胞弹性蛋白酶有较强的抑制活性,其IC50值为1.
2、50ug/ml。结论化合物II为首次从该植物中发现,该混合物的HLE活性首次报道。关键词:番石榴叶三萜白细胞弹性蛋白酶抑制剂StudyonhumanleukocyteelastaseinhibitorfromPsidiumguajavaL.ABSTRACT:OBJECTIVETostudyhumanleukocyteelastase(HLE)inhibitorconstituentsfromPsidiumguajavaL.METHODSTheactivecompoundswereisolatedbysolventextractionan
3、dchromatographyonPA、silicagel、SephadexLH20andHPLC.Theirstructureswereidentifiedbyphysicochemicalpropertiesandspectralanalysis.Ahighthrough-putscreeningmethodwasusedtoexploretheHLEinhibitor.RESULTSAmixturewasisolatedandidentifiedas2α-hydroxy-3β-(trans-p-coumaroyloxy)-urs-
4、12-en-28-oicacid(I)and2α-hydroxy-3β-(cis-p-coumaroyloxy)-urs-12-en-28-oicacid(II),andthismixtureshowedsstronginhibitoractivityagainsthumanleukocyteelastasewithIC50of1.50ug/ml.CONCLUSION2α-hydroxy-3β-(cis-p-coumaroyloxy)-urs-12-en-28-oicacidisfirstfoundfromPsidiumguajavaL
5、.,andthemixtureisreportedasahumanleukocyteelastaseinhibitorforthefirsttime.KEYWORDS:PsidiumguajavaL.;triterpene;humanleukocyteelastaseinhibitor人白细胞弹性蛋白酶(humanleukocyteelastaseHLE)是人体中的一种主要的蛋白酶,它的直接作用底物是肺、肝脏、肾脏等结缔组织中的弹性蛋白、胶原蛋白、蛋白多糖等胞外基质。体内弹性蛋白酶酶表达过多或活性过高均可导致严重的组织损伤,并造成或加重
6、多种肺气肿、慢性支气管炎、脓血症、肾炎、类风湿关节炎和某些皮肤症等疾病[1]。另外由于弹性蛋白酶可以破坏胶原纤维及组织基底膜层,在肿瘤的形成和肿瘤转移方面起关键作用,所以弹性蛋白酶成为抗癌新药的作用靶点[2]。利用该模型从植物提取物库中筛选到番石榴叶具有很好的活性,经过追踪分离,得到活性成分。本文阐述了其提取分离、结构鉴定和生物学活性。1仪器和材料人白细胞弹性蛋白酶(HumanLeukocyteElastaseHLE),多肽底物均(购自Sigma公司);Victor2多标计数仪(美国PE公司);INVOA500型核磁共振波谱仪(Voli
7、an);ZMDMicromass型质谱仪(Micromass公司);柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂),SephadexLH-20(安玛西亚公司);薄层色谱用硅胶板及色谱纯甲醇(Merk公司);显色剂为1%三氯化铝乙醇溶液和15%硫酸-乙醇溶液。其余试剂均为分析纯。HPLC为waters996型仪,固定相用C18柱(Phenomenex250mm×21.2mm,10μm)。药材番石榴叶采自云南省热带作物科学研究所内。2提取与分离将干燥的番石榴叶500g粉碎,用70%的乙醇提取两次,每次加10倍量溶剂,提取液浓缩后进行聚酰胺柱层析,依次用20%
8、、50%、80%、95%洗脱,80%和95%乙醇洗脱部分合并进行硅胶柱层析,用氯仿-甲醇梯度洗脱(10∶1、5∶1、2∶1、1∶1、甲醇),氯仿-甲醇10∶1部分经LH-20凝胶柱层析和HPLC制备,得活性
此文档下载收益归作者所有