最新第七章 螺旋体课件ppt.ppt

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1、第七章螺旋体本章重点以猪痢疾密螺旋体、钩端螺旋体为主要内容，病原体的观察方法、培养特性及诊断方法。概述螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物。基本结构与细菌类似，有细胞壁、核质、以二分裂繁殖和对抗生素敏感。根据螺旋数目、大小与规则程度，以及两螺旋间距离，分为5个属。其中不少是非致病性的。“梅毒”第一节蛇形螺旋体属（Serpulina）蛇形螺旋体属是一个新属，包括猪痢蛇形螺旋体和无害蛇形螺旋体。细胞呈疏松、规则的螺旋形，呈屈曲和蛇形运动或移位运动。有机营养,厌氧生长。可呈现微弱或强β溶血。猪痢蛇形螺旋

2、体一、生物学特性1.形态结构及染色特性本螺旋体形态结构与其属的描述一致，菌体多为2-4个弯曲，两端尖锐。革兰氏阴性，姬姆萨氏和镀银法均能使其较好着色。2.培养特性严格厌氧，一般厌氧环境不易培养成功，必须使用预先还原的培养基，并置于含的H2(或N2)和CO2(二者比例为80：20)混合气体以及以冷钯为触媒的环境中才能生长。对培养基要求苛刻，通常使用含10％胎牛(或犊牛或兔)血清或血液的TSB或BHIB培养基。在TSB血液琼脂上，38℃48-96min可形成扁平、半透明、针尖状、强β溶血性菌落。3.抗原与免疫性猪痢疾密螺旋体有两种

3、抗原成分：脂多糖、蛋白质（特异性）。该菌有8个血清型。自然发病猪康复后，可产生相应的抗体，具有一定的保护力。4.致病性常发生于8-14周龄幼猪，引起猪痢疾（血痢、黑痢、出血性痢疾、粘膜出血性痢）主要症状是严重粘膜出血性下痢和迅速减重。特征病变为大肠粘膜发生部液渗出性(卡他性)、出血性和坏死性炎症。经口传染，病原传播迅速，发病率较高(约75％)而致死率较低(5％-20％)。5.微生物学检查直接镜检(3种方法)染色镜检：以病猪的新鲜粪便粘液，或病变结肠粘膜刮取物制成薄涂片，染色镜检。多用姬姆萨氏法染色法。也可用印度墨汁作负染或镀银

4、染色法染色镜检。相差或暗视野显微镜活体检查：待检样品与适量生理盐水混合后制成压滴标本片，用相差或暗视野显微镜下镜检。若每个高倍视野中见有2-3个或更多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。染色组织切片检查：将采集的病变肠组织先用10％甲醛缓冲液固定后切片，再用维多利亚蓝染色法染色。镜检时可见螺旋体大量存在组织表面及粘液囊腔内，有时数量多到堆积成网状。分离培养：过滤培养法：将样品作5-10倍稀释，轻度离心，上清用0.8um和0.45um滤膜依次过滤。取滤液直接涂布接种于鲜血琼脂平板上，厌氧培养37-38℃培养3-6d，每隔2d检查1次

5、，当观察到平板上出现β溶血现象时，即可挑取可疑菌落，作成悬滴或压滴标本，用暗视野显微镜检查。钩端螺旋体（暗视野映光法）6.防治对猪痢目前尚无可靠或实用的免疫制剂以供预防之用。普遍采用抗生素和化学药物控制此病.培育SPF猪，净化猪群是防治本病的主要手段。第二节细螺旋体属(Leptospira)细螺旋体属成员是一大类纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体，故常称钩端螺旋体，简称钩体。大部分营腐生生活，广泛分布于各种水生环境中，无致病性。一部分为寄生性和致病性的螺旋体，可引起人和动物的细螺旋体病。一、生物学性状1.形态与染色螺

6、旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。运动活泼,常使菌体呈C、S或8字型革兰染色阴性，不易着染Fontana镀银染色法→染成棕褐色运动活泼2.培养特性在致病性螺旋体中钩体比较容易在人工培养生长。但在血液琼脂和其他常规琼脂上不生长。常用Korthof培养基含蛋白胨和10%的兔血清。大多数为液体或半固体（0.1%琼脂）。专性需氧，最佳生长温度为28-30℃。在需氧，pH7.4,28℃左右培育1-2周，可见液体培养基半透明云雾状生长。钩体的生化反应不活泼，不分解糖类和蛋白质。能产生过氧化氢酶，有些株能产生溶血素。3

7、.抵抗力热抵抗力弱，60℃1min即死亡。0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经10~30min被杀灭。对青霉素、金霉素、四环素等抗生素和各种化学消毒剂敏感性。在湿土或水中可存活数月。4.抗原结构按抗原结构分类致病性钩体具有表面抗原和内部抗原两种。表面抗原为糖蛋白复合物，具有型特异性，是钩体分型的依据。后者为类脂多糖复合物，具有属特异性，为钩体分群的依据。全世界已发现25个血清群，共200多个血清型。按DNA同源性分类5.致病物质致病物质溶血素、细胞毒因子、内毒素样物质所致疾病人畜共患传染病。我国已从50多种动物中检出钩

8、体，其中以鼠类和猪为主要传染源和储存宿主，带菌率很高，且排毒期长。牛的钩体病是全球性的，不同地区感染的血清型有所不同，但以波摩那型和哈勒焦型钩体感染最多见，我国从牛分离的有巴达维亚型。猪钩体病在我国较多见，大小猪均可感染发病或长期带菌，在许多地区猪是人钩体病的主要传染源。波摩