最新实验3-糖耐量教学讲义PPT.ppt

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1、实验3-糖耐量1.掌握血糖测定原理2.掌握OGTT的测定方法及临床应用实验目的3.熟悉OGTT曲线绘制、分析及临床意义2来源食物中糖消化吸收肝糖原分解非糖物质异生作用其它己糖转变血糖的代谢途径血糖3.9-6.1mmol/L去路彻底氧化分解合成肝、肌糖原合成脂肪、氨基酸转变为其它糖及衍生物超过肾糖阈（尿糖）37.口服葡萄糖耐量试验OGTT是口服一定量葡萄糖后，作系列血浆葡萄糖测定，以评价机体对血糖调节能力的标准方法。WHO推荐法，葡萄糖75g，对于小孩，按1.75g/kg体重计，总量不超75g。清晨空腹坐位取血后，用水250~300ml溶解5min内饮完，之后30min取血1次，共

2、4次，历时2h。临床上常用的方法是清晨空腹抽血后，开始饮葡萄糖水后30min、60min、120min和180min分别测定静脉血浆葡萄糖。8以测得的血清葡萄糖浓度为纵座标，时间为横座标，绘制成糖耐量曲线图。口服葡萄糖耐量曲线9OGTT是一种负荷试验，在明确诊断后不易再用。相关状态正常糖耐量IFGIGTDMFPG＜6.16.1~6.9＜7.0≥7.0服糖后2h＜7.8＜7.87.8~11.0≥11.1OGTT对DM相关状态的判定指标（静脉血糖mmo1/L）101112131415实验仪器及试剂小试管7支5.0ml吸管1支加样器1支722分光光度计1617空白管（B）标准管（S）测

3、定管（T0）测定管（T1）测定管（T2）测定管（T3）测定管（T4）血清（ml）————0.0200.0200.0200.0200.020葡萄糖标准液（ml）——0.020——————————蒸馏水（ml）0.020————————————工作试剂（ml）2.502.502.502.502.502.502.50实验操作步骤混匀，置37℃水浴中，保温20min，在波长500nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。然后分别计算出葡萄糖浓度C0、C1、C2、C3、C418计算:血清葡萄糖（mmol/L）=（A测定/A标准）*C标准单位换算：葡萄糖mmol/L*18=葡萄糖m

4、g/dL将各次血糖测定结果，与相应的时间绘制成糖耐量曲线图，进行分析。19注意事项加样准确，加样后立即摇匀。反应结束，冷却至室温后及时比色。实验前受试者应充分休息，避免体力活动，试验中亦不能吸烟、喝咖啡，以免影响实验结果。葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中葡萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。新配制的葡萄糖标准液主要是α型，故需放置2h以上（最好过夜），待变旋平衡后方可应用。20注意事项葡萄糖氧化酶法可以直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低

5、。因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测定样品以草酸钾-氟化钠做抗凝剂以抑制糖酵解。严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。21OGTT临床意义1.诊断妊娠期糖尿病（GDM）。2.诊断糖耐量减退病3.无法解释的肾病，视网膜病，随机血糖<7.8mmol/L.4.人群筛查.2223Logistic回归分析公共卫生学院一、前言应变量为分类指标的资料线性回归分析：应变量为连续计量资料二、Logistic回归模型Logistic回归的分类二分类多分类条件Logistic回归非条件Logistic回归Logit变换也称对数单位转换logitP=流行病学概念：设P表示

6、暴露因素X时个体发病的概率，则发病的概率P与未发病的概率1-P之比为优势（odds），logitP就是odds的对数值。Logistic回归模型Logistic回归的logit模型Logistic回归模型三、参数估计最大似然估计法（Maximumlikehoodestimate）似然函数：L=∏Pi对数似然函数：lnL=∑(lnP)=lnP1+lnP2+…+lnPn非线性迭代方法——Newton-Raphson法四、参数检验似然比检验（likehoodratiotest）通过比较包含与不包含某一个或几个待检验观察因素的两个模型的对数似然函数变化来进行，其统计量为G（又称Devia

7、nce）。G=-2(lnLp-lnLk)样本量较大时，G近似服从自由度为待检验因素个数的２分布。比分检验（scoretest）以未包含某个或几个变量的模型为基础，保留模型中参数的估计值，并假设新增加的参数为零，计算似然函数的一价偏导数（又称有效比分）及信息距阵，两者相乘便得比分检验的统计量S。样本量较大时，S近似服从自由度为待检验因素个数的２分布。Wald检验（waldtest）即广义的t检验，统计量为uu服从正态分布，即为标准正态离差。Logistic回归系数的区间估计上述