最新人教版选修第章第节DNA重组技术的基本工具共张PPT教学讲义ppt.ppt

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1、人教版选修第章第节DNA重组技术的基本工具共张PPT定向基因改造设想设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？能否让细菌“吐出”蚕丝？设想二能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？设想三基因工程的产物1900年孟德尔基因分离定律和自由组合定律的再度提出早期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程1910年摩尔根证明基因在染色体上，并提出基因的连锁互换定律早期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程1944年艾弗里证明DNA是遗传物质DNA可从一种生物个体转移到另

2、一种生物个体后期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程1953年沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型后期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程1958年梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制后期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程1958年克里克等提出中心法则后期基础理论科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程转录翻译DNAmRNA蛋白质逆转录1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。后期基础理论科技探索之路基

3、础理论和技术发展催生了基因工程科技探索之路基础理论和技术发展催生了基因工程技术发明1967年基因转移载体的发现1970年工具酶的发现1965年氨基酸测序和1977年DNA测序技术的发明1972年DNA体外重组的实现1973年重组DNA表达实验的成功1980年第一例转基因动物和1983年第一例转基因植物问世1988年PCR技术的发明专题一基因工程(geneengineering)1.1DNA重组技术的基本工具温故知新培育转基因抗虫棉的简要过程棉花细胞(不能抗虫)抗虫基因转基因抗虫棉(能抗虫)苏云金芽孢

4、杆菌目的基因提取与运载体DNA拼接导入剪刀针线运载体检测表达受体细胞分子手术刀分子缝合针分子运输车项目内容来源种类及命名识别序列数目作用特点作用结果主要来源于原核生物命名：属名头字母（大写）+种名头2字母+菌株名（通常省略）+罗马数字一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割DNA分子。特异性大多数限制酶的识别序列由个核苷酸组成少数的识别序列由个核苷酸组成64、5或8产生黏性末端或平末端种类：现已从300微生物中分离出约4000种限制酶作用1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列2

5、、在特定序列的特定位点上切割DNA断开两个核苷酸之间的磷酸二酯键。一、基因工程的基本工具1、限制（性核酸内切）酶1’2’3’4’5’脱氧核苷酸的结构G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A3’,5’-磷酸二酯键3’端5’端3’端5’端磷酸二酯键3’5’仔细观察各限制酶识别的特定序列有何特点？限制酶的识别序列限制酶所识别的序列的特点是：呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，称为回文序列中轴线在G与A之间切割大肠杆菌

6、的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。EcoRI限制酶的作用黏性末端黏性末端EcoRI限制酶的切割被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。SmaI只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。中轴线SmaI限制酶的作用在G与C之间切割平末端　　　平末端SmaI限制酶的切割当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。CTTCATGAATTCCCTAAGAA

7、GTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAGCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因黏性末端练习使用EcoRI剪切目的基因模型构建3为什么限制酶主要是在原核生物中提取的？你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割，会怎样？会产生相同的

8、黏性(平)末端如果把具有相同黏性(平)末端的DNA连接起来，又会怎样呢？得到重组DNA寻根问底2.分子缝合针--DNA连接酶项目内容种类(比较)作用对象原理结果E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶只作用于末端主要作用于末端，还可作用于末端DNA片段形成磷酸二酯键黏性平黏性通过形成新的磷酸二酯键，而将两条DNA的“扶手缝隙”连接起来，形成重组DNA把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将脱氧核糖和磷酸连接起来催化形成磷酸二酯键DNA连接酶的作用两DNA片段要具有互