最新TPALB测定课件ppt课件.ppt

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1、TPALB测定课件（一）双缩脲法测定血清或血浆总蛋白掌握：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的基本原理及操作熟悉：血清或血浆总蛋白测定的临床意义了解：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的特点及注意事项【目的】【材料】●器材半自动生化分析仪、水浴箱、试管架、洗耳球、5ml刻度吸管、15100mm试管、微量加样器●试剂双缩脲试剂硫酸铜12.0mmol/L酒石酸钾钠64.0mmol/L碘化钾6.0mmol/L氢氧化钠200mmol/L总蛋白标准液56.5g/L混合血清或血浆样本（样品1和样品2）【标本】双缩脲法测定血清或血浆总蛋白操作歩骤加入物(ml)U1-2S1B1待检血清或血浆0.025总蛋白标准液0

2、.025纯水0.025双缩脲试剂1.51.51.5混匀，置25℃30分钟或37℃10分钟，用半自动生化分析仪在波长540nm处比色，用蒸馏水调零，读取校准管和测定管的吸光度值并记录。【操作歩骤】血清或血浆总蛋白（ｇ/L）【结果计算】测定管吸光度-空白管吸光度校准管吸光度-空白管吸光度×总蛋白标准液浓度=【报告方式】血清或血浆(浆)总蛋白：△△.△g/L【注意事项】1.黄疸血清或血浆、严重脂血、溶血；葡萄糖、酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰。2.蛋白质的浓度单位用“g/L”。3.吸光度的大小与试剂的组分、pH、反应温度有关。4.双缩脲试剂中各成分的作用：碱性酒石酸钾钠：与铜离子(Cu2+)形

3、成络合物并维持铜离子在碱性溶液中的稳定性；碘化钾：抗氧化剂（KI--防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu20的沉淀)。【临床意义】1.血清或血浆总蛋白浓度降低(1)蛋白质合成障碍：主要是肝功疾病。(2)蛋白质丢失增加：严重烧伤、大出血、肾病综合征。(3)营养不良或消耗增加：长期食物中蛋白质含量不足或慢性肠道疾病引起的吸收不良；长期消耗性疾病，严重结核病、甲亢、恶性肿瘤等。(4)血浆稀释：各种原因引起的水钠潴留。2.血清或血浆总蛋白浓度增高(1)蛋白合成增加：如多发性骨髓瘤。(2)血浆浓缩：凡体内水分的排出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩。（二）溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白掌握：溴甲酚绿

4、法测定血清或血浆白蛋白的原理及操作熟悉：血清或血浆白蛋白测定的临床意义了解：溴甲酚绿法测定清白蛋白的特点及注意事项【目的】【原理】白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴甲酚绿（BCG）结合形成蓝绿色复合物，在波长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例，与同样处理的白蛋白标准比较，可求得白蛋白含量。溴甲酚绿+白蛋白蓝绿色复合物（A630nm）pH4.2BCG法优点：①操作简便、快速、试剂单一。②白蛋白具有与阴离子染料BCG（或BCP）结合而球蛋白基本不结合的特性。③干扰物质少(溶血、胆红素、中度脂血无干扰)。④特异性、准确性较

5、好、精密度好（RCV＜4％）是目前临床测定血清或血浆白蛋白最用的常规方法。【材料】器材半自动生化分析仪、水浴箱、试管架、洗耳球、5ml刻度吸管、15100mm试管、微量加样器●试剂BCG试剂pH4.2琥珀酸缓冲液10mmol/L溴甲酚绿16umol/L叠氮钠0.50mmol/LBrij-35（聚氧化乙烯月桂醚）0.125g/L白蛋白标准液52.5g/L样品号（样品1和样品2）【标本】BCG法测定血清或血浆白蛋白操作歩骤加入物(ml)U1-2S2B2待检血清或血浆0.01白蛋白标准液0.01纯水0.01BCG试剂2.02.02.0混匀，用半自动生化分析仪立即在波长630nm处比色，用蒸馏水

6、调零，读取校准管和测定管的吸光度值并记录。【操作歩骤】血清或血浆白蛋白（ｇ/L）【结果计算】测定管吸光度-空白管吸光度校准管吸光度-空白管吸光度×白蛋白标准液浓度=【报告方式】血清或血浆(浆)白蛋白：△△.△g/L【注意事项】1.控制反应液的pH是本法测定的关键。试剂混浊，pH范围超过4.1-4.3，试剂不能用。2.BCG与白蛋白的反应强度和环境温度有关。3.由于在30s内呈色对白蛋白特异（快反应），BCG与血清或血浆混合后，在30s读取吸光度，可明显减少非特异性呈色反应。4.叠氮钠有防腐的作用；聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度，提高呈色的稳定性，也可

7、用其他表面活性剂，灵敏度和线性范围不变。【临床意义】1.血清或血浆白蛋白浓度增高常见于严重脱水所致的血浆浓缩。2.白蛋白浓度降低在临床上比较重要和常见，通常与总蛋白降低的原因大致相同。急性降低主要见于大出血和严重烧伤；慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功能受损、肠道肿瘤及结核病伴慢性出血、营养不良和恶性肿瘤等。血清或血浆白蛋白低于20g／L，临床上出现水肿。3.A／G比值：某些病人可同时出现白蛋白减少和球蛋白升高的现象，严重者A／G比值<1