最新miR-181b与炎症关系实验解读课件ppt.ppt

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1、miR-181b与炎症关系实验解读细胞实验一：miR-181b对HUVEC功能影响1、TNF-α影响miR-181b表达(A)Real-timeqPCRanalysisofmiR-181binresponsetoTNF-α(10ng/ml)inHUVECs.短时间作用不同时间点作用细胞实验二：miR-181b靶点的确定1、TNF-α(+)(-)，WB筛查靶点只使用了miR-181b-m及对照2、荧光素酶报告系统实验1、仅使用miR-181b；2、载体使用浓度梯度3、用真核细胞表达载体将miR-181b导入细胞3、m

2、iR-181b与靶点结合区域的确认(D)Normalizedluciferaseactivityofareportercontaining3′UTRofimportin-α3,predictedmiR-181b–bindingsites,ormutatedmiR-181b–bindingsites.ThereporterwascotransfectedwitheitherpcDNA3.1emptyvectororpcDNA3.1–miR-181b.*P<0.05.4、miRNP-IP分析靶点mRNA富集(E)miR

3、NP-IPanalysisofenrichmentofimportin-α3mRNAinHUVECstransfectedwithmiRNAnegativecontrolormiR-181bmimics.*P<0.01.细胞实验三：miR-181b对下游通路的作用1、荧光素酶报告系统检测miR-181b对NF-κB及VCAM1影响TNF-α(+)(-)条件下，HUVECs中miR-181b对NF-κB活性及VCAM1promoter活性的影响2、miR-181b通过作用于靶蛋白影响NF-κB活性(F)Lucifer

4、aseactivityofreporterscontainingtheNF-κBconcatemerincellstransfectedwithmiRNAnegativecontrolormiR-181bmimicsintheabsenceorpresenceofimportin-α3genelackingits3′UTR.*P<0.05.3、miR-181b对HUVECsNF-κB活性的影响4、TNF-α(+)，miR-181b影响NF-κB下游mRNA表达瞬时转染稳定转染3、对下游蛋白表达的影响Invivo1：

5、miR-181b对粘附因子表达的影响①VCAM-1mRNA及蛋白水平检测尾静脉注射，瞬时转染②VCAM-1组织原位杂交③组织水平确定miR-181b靶蛋白合同法-18保管合同与仓储合同9/14/2021内容一、保管合同（一）概述（二）当事人的责任（三）消费保管合同9/14/2021（一）概述1、概念和特征1-1概念：保管合同是保管人保管寄存人交付的保管物，并返还该物的合同。3659/14/20211-2特征1-2-1标的为保管行为1-2-2有偿？无偿？3661-2-3双务、不要式1-2-4保管合同转移标的物占有9/

6、14/20211-3保管合同标的物动产？不动产？9/14/2021（二）当事人的责任1、保管人的义务1-1给付保管凭证1-2妥善保管保管物1-3亲自保管标的物1-4不得擅自使用或许可第三人使用保管物1-5危险通知义务1-6返还保管物9/14/20212、寄存人的义务2-1支付保管费以及其他费用2-2保管物情况的告知义务2-3贵重物品的声明义务9/14/2021（三）消费保管合同1、概念和特点2、与类似概念的区别9/14/20211、概念和特点1-1概念消费保管合同，又称不规则保管合同、可替代物保管合同，是指保管物为

7、种类物，双方约定保管人取得保管物的所有权，而仅以相同种类、品质、数量的物品返还给寄存人的保管合同。9/14/20211-2特点1-2-1标的物为种类物1-2-2保管物发生所有权转移9/14/20212、与类似概念的区别2-1与一般保管合同的区别2-1-1标的物不同2-1-2转移的权利不同2-1-3返还的义务不同9/14/20212-2与消费借贷合同的区别2-2-1目的不同2-2-2返还义务不同（保管-随时；借贷-催告）9/14/2021二、仓储合同（一）仓储合同概念和特点（二）仓单（三）仓储合同的效力9/14/20

8、21（一）仓储合同概念和特点1、概念：仓储合同是保管人储存存货人交付的仓储物，存货人支付仓储费的合同。#3819/14/20212、特点2-1保管人是从事仓储保管业务的人2-2仓储物为动产2-3诺成合同2-4双务、有偿、不要式合同9/14/2021（二）仓单1、概念9/14/20212、仓单的性质仓单为要式证券仓单为背书证券仓单为物权证券仓单为文义证券仓单为