最新lab3双层琼脂扩散法筛选抗菌活性菌株应用教学讲义ppt.ppt

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1、lab3双层琼脂扩散法筛选抗菌活性菌株应用二实验原理抗菌活性菌株是指那些在生长过程中能够产生抑菌或杀菌活性物质的微生物，通常利用抗生素测定的方法给予检出。抗菌抗生素的测定主要有稀释法、比浊法和扩散法。扩散法是利用药物在琼脂中扩散使其周围的指示菌生长受到抑制而形成抑菌圈，根据抑菌圈的大小来判断抗菌活性。扩散法包括了纸片法、管碟法、点滴法等多种方法。本实验采用的双层琼脂扩散法是一种抗菌活性菌株快速简便的初步筛选方，既直接在琼脂培养基上培养供测菌，产生的抗生素在琼脂中扩散，加入指示菌后测量抑菌圈直径和菌落直径比值（Di/Dc)，根据比值的大小检出活性菌株。三材料与器材菌种：链霉菌,枯草杆菌，大肠

2、杆菌.培养基：高氏1号培养基，牛肉膏蛋白胨培养基.培养皿，移液管等.下咽癌(hypopharyngealcarcinoma)概述下咽癌的定义发病率致病因素治疗原则预后发病率下咽癌约占头颈部恶性肿瘤的0.8%~1.5%梨状窝60%~70%咽后壁25%~30%环后区5%~10%解剖下咽亦称喉咽。位于喉的后方，会厌上缘至环状软骨下缘平面之间，相当于第三至第六颈椎。其上分较宽，下分较窄。上与口咽相连，下与食管相接。分为三个区域：梨状窝区、环后区和咽后壁区。下咽分为三部份：梨状窝、咽后壁和环后区梨状窝会厌咽皱襞和三个壁（前壁、内侧壁、外侧壁）咽后壁会厌溪的底部至环状软骨下缘环后区即环状软骨后缘的区域

3、淋巴引流丰富最常见部位（同侧、对侧）与T分期无关75%的患者出现淋巴结转移病理及生物学行为病理类型生长方式生物学行为梨状窝癌：具有早期黏膜下浸润性生长的特点，实际病变范围超过肉眼所见咽后壁区癌：通常分化最低。环后区癌：分化程度较高。临床表现症状咽部异物感：常为首发症状吞咽疼痛咳嗽或呛咳吞咽困难声音嘶哑体征喉外形改变下咽部肿物：临床可通过间接喉镜检查发现。颈部肿块诊断（ENT）下咽癌早期诊断较困难，由于下咽的解剖部位隐蔽，早期癌的临床症状一般不典型。患者就诊时主诉吞咽困难、吞咽疼痛，声嘶等症状通常已属晚期。临床特点与喉咽检查：原发部位不同而症状表现各异。间接喉镜或电子喉镜检查可了解肿瘤的部位

4、。颈淋巴结检查影像学检查病理活检：明确诊断影像学检查X线检查CT/MRI：CT/MRI由于具有较好的软组织分辨能力，有助于发现下咽癌原发灶及其侵犯的范围、颈淋巴结转移的部位。通过MRI的横断面、冠状面及矢状面扫面，可以更准确了解肿瘤侵犯下咽的邻近部位及颈淋巴结转移的情况，有助于临床TNM分期。鉴别诊断由于下咽癌的临床症状与喉咽的一些良性病变症状极为相似，临床需要与喉咽部炎症以及良性肿瘤鉴别，包括血管瘤、平滑肌瘤、脂肪瘤和纤维肉瘤等。对于隐匿型的下咽癌早期出现颈淋巴结转移时，需要与慢性淋巴结炎以及颈淋巴结结核鉴别。UICC/AJCC2002年TNM临床分期T原发肿瘤T1：肿瘤局限于下咽的一个

5、解剖部位，且肿瘤的最大直径≤2cmT2：肿瘤侵犯下咽部一个以上解剖部位或邻近组织，或肿瘤的最大直径≤2cm，而<4cm，不伴半喉固定T3：肿瘤最大直径>4cm，或伴半喉固定T4a：肿瘤侵犯甲状软骨/环状软骨、舌骨、甲状腺、食管或中央隔软组织T4b：肿瘤侵犯椎前筋膜，保绕颈动脉，或累及纵隔结构UICC/AJCC2002年TNM临床分期N区域淋巴结Nx：区域淋巴结情况不能评价N0：无区域淋巴结转移N1：同侧单个淋巴结转移，最大直径≤3cmN2：同侧单个淋巴结转移，最大径>3cm，但≤6cm，或同侧多个淋巴结转移，最大径均≤6cm；或双侧/对侧淋巴结转移，但其最大径均≤6cmN2a：同侧单个淋巴

6、结转移，最大径>3cm但≤6cmN2b：同侧多个淋巴结转移，最大径均≤6cmN2c：双侧/对侧淋巴结转移，最大径均≤6cmN3：转移淋巴结的最大直径>6cmM远处转移Mx：有无远处转移不能确定M0：无远处转移M1：有远处转移临床分期0期TisN0M0Ⅰ期T1N0M0Ⅱ期T2N0M0Ⅲ期T3N0M0T1-3N1M0ⅣA期T4aN0-1M0T1-4aN2M0ⅣB期T4bN0-3M0T1-4N3M0ⅣC期T1-4N0-3M1治疗原则治疗原则是提高肿瘤的局部控制率，降低喉咽器官功能损伤的程度，尽可能地保持喉咽及喉的正常生理功能。可根据临床分期选择最佳治疗模式。临床资料表明，早期下咽癌手术与单纯放疗

7、疗效相似，而单纯放疗可以保存喉咽的功能。因此，对Ⅰ期应首选单纯根治性放疗。对Ⅱ/Ⅲ期者可以选择手术＋术后放疗。对没有远处转移的Ⅳ期患者可选用术前放疗＋手术＋术后放疗或术前化疗＋手术＋术后放疗。但对于有远处转移者则以化疗为主。化疗对下咽癌的治疗效果尚不明确。肿瘤部位分期治疗策略全喉切除+同侧淋巴结清扫和术后放疗梨状窝不能切除或内科原因不能手术单纯放疗（65~70Gy）或部分喉切除+同侧淋巴结清扫（根据术后病理考虑放疗）淋巴