景天科三个属植物组培体系的建立与植株再生研究.docx

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1、景天科三个属植物组培体系的建立与植株再生研究本试验对景天科三个属植物“初恋”(Echeveriacv.Huthspinke)、“白牡丹”(GraptoveriaTitubans)、“冬美人”(PachyveriaPachytoides)进行了组织培养体系建立以及植株再生机理的研究。以“初恋”、“白牡丹”、“冬美人”的叶片为试验材料,通过对叶片进行无菌处理、接种,不定芽诱导,幼芽增殖,试管苗生根和驯化建立一套完整的组织培养体系,同时对体细胞胚胎的发生过程进行显微观察,明确“初恋”、“白牡丹”、“冬美人”体细胞胚胎的发生机理,为高效的植物组织培养及工厂化生产奠定基础。本试验的主要结果如

2、下：1“初恋”、“白牡丹”、“冬美人”组织培养体系的建立不定芽诱导：以植株的叶片为外殖体,灭菌15min,激素采用6-BA、NAA、ZT,进行正交试验设计。试验结果显示,MS+6-BA3.0mg/L+NAA1.0mg/L+ZT1.0mg/L为最佳不定芽诱导培养基。幼芽增殖：在培养基中添加6-BA,浓度为1.0mg/L、5.0mg/L,NAA浓度为0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L。经增殖培养得到最适宜幼芽增殖培养基：MS+6-BA5.0mg/L+NAA01mg/L。试管苗生根：以1/2MS和MS为基本培养基,添加活性炭及NAA,浓度为0.1mg/L。试验

3、结果表明,“初恋”、“白牡丹,,最适宜生根培养基为MS+活性炭3.0mg/L+NAA0.1mg/L,“冬美人”最佳生根培养基为1/2MS+活性炭3.0mg/L+NAA0.1mg/L。试管苗移栽：移栽基质采用纯草炭、草炭：珍珠岩=1：1、草炭：沙子=1：1、草炭：珍珠岩：蛭石=1：1：1,最适宜“初恋”、“白牡丹”、“冬美人”地上部及地下部生长的炼苗基质是纯草炭。2“初恋”、“白牡丹”、“冬美人”植株再生机理的研究采用石蜡切片对体细胞胚胎形态组织学进行观察,初恋”、“白牡丹”“、冬美人”的叶基部及叶中部在MS+6-BA3.0mg/L+NAA1.0m/g/L+ZT1.0mg/L培养基中

4、培养,叶基部成功培养出体细胞胚胎。通过显微观察,体胚起源于叶基部具有发育潜力、细胞质稠密、细胞核大等特点的薄壁细胞,发育过程经历原胚细胞团、球形胚、心形胚、鱼雷胚以及子叶胚这五个时期。“初恋”体胚发育较快,“冬美人”次之,“白牡丹”体胚发育最慢。叶中部经培养发育出类原球茎,通过组织细胞学观察,类原球茎起源于叶片近轴面的表皮细胞及亚表皮细胞,发育形成成熟类原球茎,成熟类原球茎培养后又会形成大量的次生类原球茎,最后经培养形成若干个完整个体。类原球茎发育过程与体胚相似,不同点则为体胚具有双极性,类原球茎只有芽极。