Labfors3发酵罐灭菌操作规程.doc

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1、Labfors3发酵罐灭菌操作规程 1、取下马达，平放于桌上。罐顶端套上黑色保护帽。 2、由罐上取下温度传感器，该传感器不需要灭菌。 3、取下PH电缆线，盖上红色保护帽；将PH电极要插到底。务必拧紧电极的上下两个固定螺帽。PH电极灭菌前要标定。4、取下DO电缆线，DO电缆接口处用锡箔纸包好后套上黑色帽。DO电极灭菌完后标定。5、取下消泡或液位电缆线，将消泡或液位电缆插到底，灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去。消泡电极的高度离液面约1.5cm处。 6、拆下发酵罐上和冷凝器上的进、出水管，拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处，以防水流出。 7、发酵罐上的过滤

2、器的两端要用夹子夹死，过滤器的出口处用锡箔包好，所有过滤器的两端要用夹子夹住。发酵完毕倒罐后注意检查过滤器是否被打湿，若有则赶快用吸球将其中的液体吹出。 8 、用铁夹夹死收获管上的硅胶管以防在灭菌锅内跑液。收获管不用时上面一定要卡死不移走。 9、在灭菌前.将发酵罐的六个固定螺帽拧松出气，其他螺帽一定要拧紧！灭菌后打开高压锅立刻将其拧紧，注意戴上手套防止被烫伤。 10、酸不要放高压锅内灭菌，将空的酸液瓶上的过滤器用锡箔包好，并将瓶盖拧松出汽。灭菌完后去掉锡箔过滤器上的锡箔纸作为出汽口。（注意与酸瓶相连的硅胶管不要卡死）；碱液瓶和硅胶管可以一起灭菌（与碱液瓶相连的硅

3、胶管要卡死）。 11、取下电热夹套将其平铺于桌面。 12、灭菌前调整好搅拌叶的位置，底下的搅拌叶尽量靠近空气分布器，上面的一个位置调整到所加发酵液的中间位置。13、取样器的位置不要靠近挡板的位置，尽量靠中间位置。14、灭菌前将取样器的吸球取下。所有的硅胶管不要靠到高压锅的内壁上。 灭菌完毕后1、将六个松开的固定螺帽和酸碱瓶盖拧紧。2、去掉包在过滤器上的锡箔纸和卡硅胶管的夹子。3、装上马达，若马达内侧润滑油干了，涂上适量的凡士林。4、接上溶氧电缆线后进行DO电极标定：灭菌完后接上DO电极的电缆线后在set zero处输入0；将反应器的空气流量控制在1L/min,A

4、gitation调到100r/min过夜，早上开在set span处输入100后按确认键。5、等温度降到发酵所需温度时接好各进出水管、PH电缆线，消泡电缆线。6、在放入温度电极之前，先往温度电极的进口里滴加甘油，插入电极后继续滴加到冒出止。注意温度电极要插到底。7、.检查空压机的输出压力，应在0.7~1.0kg/cm3 范围内。8、消泡剂的硅胶管要按从下往上顺序在泵上安装。 Labfors3发酵罐操作规程操作前请认真检查冷水机、空压机、反应器、进出水管、气管情况。填好使用说明书。开机：先打开其他单元上的开关，再打开主机背后的开关。关机：先把控制器上所有单元的参数

5、状态调到off，把进气开关打开后关机；关机时先关控制器后面开关，再关其他单元上的开关。冷水机工作温度的设定开机：接好进出水管→打开总电源→进行温度设计→打开循环泵→开始制冷关机：先关制冷开关→关循环泵开关→同时将进、出水口阀门关闭→关上电源温度设定：开机→面板显示“PP0.0” →按“移位键”和“调整键”后显示“PP0.1”→按SET键确认→此时面板显示上限值，按“移位键”和“调整键”设定上限值→按SET键确认→此时面板显示下限值，按“移位键”和“调整键”设定下限值→按SET键确认→再按SET键→再按SET键→面板显示结束标志“---”，按SET键回到测量显示，

6、设置结束。 上述操作结束后准备接种接种准备：准备好铁挡板、打火机、酒精喷壶、接种圈、装95%乙醇的搪瓷缸容器、尖头钳子、活动扳手，接种瓶。接种操作1、移开接种口附近的胶管，将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点着，（注意：如果有火焰顺着酒精溢出铁板外，则需要吹灭铁板两侧溢出的火焰。）2、将接种圈沾酒精点着后套住接种口处，将扳手或钳子沾酒精后拧开螺帽后用钳子将其夹住拿出，吹灭螺帽和钳子上的火焰后迅速放入装95%乙醇的搪瓷缸容器里。3、将接种瓶在火焰处拔开后迅速倒入发酵罐内。完毕后用钳子夹出螺帽拧上。整个过程确保无菌操作！ 溶氧设定：按off键→按con

7、trol键→ 按Auto键→setup→cascade→选择。选择U1：1、开机后→按use键→按U1～U4单元的Fermentation 或cell culture键选择发酵模式或细胞培养模式；连续按翻阅键→分别对U1～U4单个单元进行控制操作。2、Tem→按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键，输入设定值→按确定键→按 Disp Hi输入上限值后按确定键→ 按 DispLo输入下限值后按确定键；输入值若有错误按删除键后更改。搅拌设定：按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定转速值→按确定

8、键→Disp Hi和Di