实验三 发酵罐使用及灭菌.ppt

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1、实验三培养基的制备、实罐灭菌及接种培养技术一、实验目的：学会反应器实罐灭菌，掌握无菌接种技术，掌握培养方法。二、实验原理：发酵罐能够提供微生物生长的适宜环境。三、实验器材发酵罐，带灭菌培养基等。L1523发酵罐操作流程1、发酵前准备工作1)把进气过滤器、补料瓶、及可能用到的各种插针在高压锅内灭菌。2)打开水、电、空压机3)打开发酵罐总电源4)校正PH电极。之后插入发酵罐内5)将提前配好的培养基放入罐内，并加入消泡剂。四、操作步骤2、发酵过程1)灭菌①插入所需电极，调整消泡电极高度，关闭罐盖上所用

2、接口(确认无任何软管连接)。②启动搅拌，设定转速在300-500r/min。③设定温度setp1的值为“0”，使夹套进水。保持约2分钟后，再改回培养温度。④打开排气。⑤设定灭菌菜单，确认后启动灭菌模式，开始灭菌。[具体方法见后]A．到95℃时，系统出现提示，此时关小排气(关闭后，回旋1/3圈)，按“OK”。B．当温度达到121℃时，较正PO2零点。C．降温到100℃时，系统出现提示。此时，在火焰保护下接好进气插针，并通入压缩气体。D．到达培养温度后，设定好转速、通气量后。此时校正PO2的100%

3、。2）接种3）补料4）取样补料时在火焰保护下插针，需加酸时禁止采用HCl(对不锈钢有腐蚀性)通过蒸汽灭菌罐底取样口取样5)放料放料前，务必先要关闭温度和转速，确认面板显示“OFF”接种可采用两种方法：一是采用火焰保护，二是用蠕动泵流加。3、清洗4、关机在关闭电源前，确认温度和转速处于“OFF”状态。电源关闭后，及时关闭冷却水。发酵罐在不使用的情况下，一般保持一定体积的清水。在不开罐的情况下，放入水，加大转速即可。废水可以从底阀排出。实验报告：1、灭菌时为什么要搅拌？2、降温时为什么要通气？