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时间:2021-02-01
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1、微生物的分离与纯化:从自然界或混有杂菌的培养体中将所需要的微生物提纯出来的获得纯培养的方法。分离:从存在于自然界的混合菌群中分离出一种微生物,并加以培养。选择培养分离:通过抑制大多数微生物的生长或者造成有利于该菌生长的环境,再通过稀释平板方法进行微生物纯培养的分离技术。生长曲线:将少量单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的液体培养基中,在适宜条件下培养,定时取样,测菌量。以培养时间为横坐标,以细菌增长数目的对数为纵坐标,绘制所得的曲线。代时:单个细胞完成一次分裂所需要的时间。产量常数:表示微生物对基质利用效率
2、的高低,Y=菌体干重/消耗营养物质的浓度。恒浊培养:在恒浊器内,调节培养基流速,使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法。恒化培养:以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。细胞固定化:是通过包埋法、微胶囊法、吸附法等将细胞固定在载体的内部或表面,加入营养液及合适的培养条件,得到代谢产物。优点:可提供高密度的细胞;减少细胞的流失,反复利用;简化细胞与代谢产物的分离工艺。缺点:成本高;易污染;物质传递阻力大;只能用于细胞分泌型产物的发酵。同步培养法:能获得处于同一生长阶段的群体细胞的培养方法。
3、同步生长:运用同步培养技术,控制微生物生长,使之处于同一生长阶段并同时分裂。高密度培养:指微生物在液体培养基中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术。选取最佳培养基成分和各成分含量;补料;提高溶解氧的浓度;防止有害代谢产物的生成。灭菌:采用任何强烈理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失生长繁殖能力的措施。杀菌:菌体虽死,形体尚存。溶菌:菌体被杀死以后,细胞自溶、裂解而消失。消毒:采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分的病原菌,而对被消毒的对象基本无害。防腐:采用某种理化因素完
4、全抑制微生物的生长繁殖(制菌作用)化学治疗:指具有高度选择力(对病原菌具高度选择力而对其宿主基本无毒)的化学物质来抑制宿主体内的病原微生物的生长繁殖,达到治疗宿主疾病的目的的一种措施。基因突变:指DNA特定部位上核苷酸顺序的变化,致使蛋白质的结构改变,最后导致个体表型不同。表型:基因突变形成新的基因型在一定环境条件下表现出来的个体性状。突变体:突变产生新表型的个体。同义突变:DNA复制时,DNA链中某个碱基被另外一个碱基替代,但是不会影响到其所翻译的蛋白质的结构和功能。无义突变:由于某个碱基的改变使代表某
5、种氨基酸的密码子突变为终止密码子,从而使肽链合成提前终止。错义突变:是编码某种氨基酸的密码子经碱基替换以后,变成编码另一种氨基酸的密码子,从而使多肽链的氨基酸种类和序列发生改变。移码突变:在基因编码区,核苷酸插入或缺失导致三联体密码子阅读方式的改变,从而使该基因的相应编码序列发生改变。条件致死突变型:在野生型生物可生育或增殖的条件下,而不能生育或增殖的突变型,即需要特定的营养物质的营养缺陷型以外的突变型,称为条件致死突变型。诱变:采用某些诱变剂以人工方法引起遗传物质结构改变,使其产生人类所需要的产品。诱变
6、剂:能使突变率提高到自发突变水平以上的物理、化学和生物因子。诱发突变:用诱变剂产生新的突变,而是通过不同的方式提高突变率。工业用微生物的基本要求?(1)菌株为“纯培养”;(2)菌种具有稳定的遗传性;(3)菌株生长迅速(4)产生目的产物时间短;(5)尽可能自我保护;(6)产物单一,易于分离从土壤中采样分离:挖土—稀释—接种—培养分离常用的分离培养基?细菌:肉膏蛋白胨培养基放线菌:高氏Ⅰ号培养基真菌:马铃薯培养基;马丁氏培养基;查氏培养基酵母:麦芽汁培养基随机筛选法分离纯化微生物的方法•平皿划线分离法•倾注平
7、皿稀释分离法•涂布平板法•液体分离法(适用于细胞较大的微生物。用液体培养基对菌液做10倍系列稀释,使试管中只存在一个细胞,由此繁殖得到的后代必是纯培养。)•厌氧菌的的稀释分离法(石蜡液封)•单细胞挑取法(采用显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养的方法。该方法要在显微镜下进行。这种方法要求操作人员技术熟练)富集培养分离:创造特定的环境条件(温度、PH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等),使仅适应于该条件的微生物生长旺盛,从而使其在群落中的数量大大增加。再通过稀释平板法分离纯化
8、。选择性分离技术:1、选择培养分离:分离特定微生物;抑制大多数微生物的生长或者造成有利于该菌生长的环境,再通过稀释平板方法进行纯培养;通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。2、富集培养分离:创造特定的环境条件(温度、PH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等),使仅适应于该条件的微生物生长旺盛,从而使其在群落中的数量大大增加。再通过稀释平板法分离纯化。微生物的筛选方法?1、初筛方法:纸条测定法&纸条与平板结合测定
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