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《GBT 17813-1999 复合预混料中烟酸、叶酸的测定高效液相色谱法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB/'r17813-1999前言复合预混料中烟酸、叶酸的测定目前尚无国家标准和国际标准，本标准是在查阅国外文献的基础上，经过试验比较选择了用高效液相色谱法测定复合预混料中烟酸、叶酸。该方法与美国公职分析化学家协会(AOAC)方法比较，简便、快速，准确度、精密度效果相当。本标准在技术内容上参照国外方法，确定了标准范围、试剂、测定条件，即反相离子色谱条件和反相缓冲液系统条件。在编写格式上依据GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分:标准编写的基本规定》和GB/T1.4-1988((标准化工作
2、导则化学分析方法标准编写规定》。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。本标准主要起草人:陈必芳、李兰、梁冬生。中华人民共和国国家标准复合预混料中烟酸、叶酸的测定高效液相色谱法GB/T17813-1999Determinationofnicotinicacidandfolicacidincompoundpremix-High-pressureliquidchromatography1范围本标准规定了复合预混料中烟酸、叶酸的测定—高效液相色谱法。本标准适用于复合预混料和维
3、生素预混料中烟酸、叶酸的测定。测量范围为每千克样品中含烟酸的量在1000mg以上，含叶酸的量在500mg以上。2引用标准下列标准中所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法3方法原理试样中的烟酸、叶酸用水一甲醇一乙酸混合溶液提取，将滤液注人高效液相色谱反相柱上进行分离，用紫外检测器在280nm波长处定量测定。4试剂和材料除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯.水
4、为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682的规定4.1甲醇:优级纯。4.2三乙胺4.3冰乙酸。4.4烷磺酸钠(PICB6):cCCH,(CHr)5S0,Na)=0.005mol/I{或pCCH,(CH..),SO,NaI=941mg/I)。4.5标准溶液配制4.5.1烟酸标准贮备液:称取经过干燥的烟酸标准纯品25.0mg,`N.于250ml,棕色容量瓶中，用移动相溶解，稀释至刻度，于冰箱保存，可放置一周。4.5.2叶酸标准贮备液:称取经过干燥的叶酸标准纯品25.0mg,.于250ml容量瓶中，用碳酸钠溶液(4.8)溶解
5、，调至pH7.。定容至刻度，于冰箱保存。4.5.3烟酸、叶酸标准工作液准确吸取4.5.1和4.5.2各10ML，用移动相稀释至50ml或100ML.该混合标准溶液置于带盖小瓶贮存，供液相色谱仪分析用，当日使用。国家质量技术监督局1999一08一10批准2000一02一01实施Gs/T17813-19994.6提取液:取500mL去离子水，加10mL冰乙酸((4.3),1.3ml三乙胺(4.2)，用去离子水定容至1I，此时pH为3.2，过0.45pm滤膜，取上述溶液850mL与150mL甲醇(4.1)混合4.7磷酸缓冲液:称取4
6、.84g的磷酸氢二钾(K,HP0,),9.82g磷酸二氢钾(KH,P04),溶于去离子水中，加20ml乙腊，用去离子水定容至1L,混匀用2000氢氧化钾调节pH至6.504.8碳酸钠溶液:c(Na,CO.,)=0.1mol/L.5仪器、设备5.1实验室常用仪器设备。5.2超声波水浴。5.3超纯水装置(Millipore或全磨口玻璃蒸馏器)。5.4离心机:3000r/min.5.5高效液相色谱仪:带自动进样器、紫外可调波长检验器。6试样制备选取有代表性的样品至少500g，四分法缩减至100g,磨碎，全部通过。.28mm孔筛，混匀
7、，装入密闭容器中，避光低温保存备用。7分析步骇7.1试验溶液的制备称取试样维生素预混料0.5-1g或复合预混料1-5g,精确至。.0001g,置于100mL棕色容量瓶中，加10mL碳酸钠溶液((4.8)，浸湿试样加70mL提取液(4.6)混匀，于超声波水浴上振荡提取15min，用提取液定容至刻度，混合均匀，过滤或离心。再经0.45pm过滤膜过滤至带盖小瓶中，调整该试验溶液的浓度(5pg/mL，供高效液相色谱分析用。7.2测定7.2.1色谱条件7.21.1反相离子对色谱条件柱长:25cm、内径4.0mm不锈钢柱。固定相:ODS(
8、C,e)粒度5km,移动相:取500mL去离子水，加10ml冰乙酸,1.3mI三乙胺，一小瓶20mI_己烷磺酸钠((4.4),用去离子水定容至1L，调节pH为3.2，过0.45pm滤膜，取上述溶液850mL与150mL甲醇混合，脱气流速1.0mL/min,温度:30C。进样量
