SDS法提取DNA说课材料.doc

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1、精品好文档，推荐学习交流SDS法提取DNA植物各个部位都可用作总DNA抽提的材料，常用的材料一般为植物幼叶。其基本原理是：先用机械的方法使组织和细胞破碎，然后加入十二烷基磺酸钠（SDS）等离子型表面活性剂，溶解细胞膜和核膜蛋白，使细胞膜和核膜破裂。再加入酚和氯仿等表面活性剂，使蛋白变性。最后加入无水乙醇沉淀DNA；沉淀的DNA，即为植物总DNA，溶于TE溶液中保存备用。三、实验材料、器具及试剂水稻幼叶高速台式离心机，振荡器，水浴箱，1.5ml离心管架，玻璃滴管，移液器，研钵，1.5ml离心管，2ml离心管，枪头，烧杯，量筒等。无水乙醇，氯仿，异戊醇，TE缓冲

2、液（pH8.0）,抽提液（200mMTris-HCl,PH7.5;250mMNaCl;25mMEDTA;0.5%SDS）四、实验步骤⑴　取幼叶5g左右放于研钵中,加入少许石英砂，再加入400μl抽提液，磨成绿色浆状。⑵　倒入2ml离心管。约用400μl抽提液洗涤研钵，也倒入离心管，将两次抽提液混匀。⑶　置于56℃水浴中5分钟。⑷　加入适量氯仿，振荡，充分混匀。⑸　14000rpm离心5分钟。取上清液于1.5ml离心管。⑹　加入等体积预冷的无水乙醇，轻轻混匀，静置直到DNA析出。⑺　14000rpm离心2分钟，去上清液。⑻加入70%乙醇漂洗。适当风干，溶于10

3、0-200μlTE溶液中待用。五、注意事项：⑴　幼叶不宜太多；氯仿的量尽可能多些；与氯仿混合时充分摇匀，否则蛋白变性不完全。⑵　研磨幼叶后匀浆较重要，这直接影响DNA的产量。⑶处理：若第5步上清液较为混浊，则需要重复第4和第5步。TVS管相关知识在设计中，使用到了TVS管，在之前的设计中没有特别关注TVS管。今天查了一些资料，算是简单的有个了解。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2精品好文档，推荐学习交流TVS管是一种保护器件。它的英文全称为transientvoltagesuppressor，意思是瞬态电压抑制器。TVS管是一种二极管形式的器件。其

4、原理有点像稳压二极管，都是利用反向击穿稳定电压，但TVS管的响应速度要快于稳压管。当TVS管的受到反向瞬态高能量冲击是，它能以极高的速度（亚纳秒级）将两级间的阻抗变为低阻抗，从而具有很好的浪涌功率吸收能力，同时也能使两级之间的电压保持在一个预定值，有效的保护电路中其他元器件的免受浪涌脉冲的损坏。 顺便把TVS管和稳压管两者比较一下： 【相同点】 1.都可以限制两端电压在一定得范围内。 2.长时间耐流值差不多，跟体积功耗有关。 【不同点】 1.电压精度上  稳压管的稳压值比较精确，TVS是在一个范围内 2.通流能力上  稳压管的耐涌浪电流很小，而TVS可以达到

5、几百A 3.原理上      稳压管是齐纳隧道效应或雪崩效应，TVS是雪崩效应 4.应用上      稳压管用于稳压，TVS用于瞬态高压保护 5.稳压值上    稳压管3.3V~75V,TVS管6.8V～550V 6.响应时间    TVS可以达到1ps 比较后就比较清楚了，稳压二极管和TVS管是不可以相互替代的。清楚了原理我们来看TVS管的一些参数，我们通过Datasheet来看，这样比较直观。 figure1datasheet中的选型参数第一栏和第二栏是和具体器件相关的，我们不管它。REVERSESTAND-OFFVOLTAGEVRWM(V)反向峰值电压

6、,这个即TVS管的工作电压,保证在正常工作时,TVS管两端的电阻很大，这就保证了TVS管吸收的电流可以忽略不计。一般来说，这个值等于或略大于正常工作电压。BREAKDOWNVOLTAGEVBR(V)MIN&MAX@IT反向击穿电压，表明在直流电流IT条件下，测得的反向电压值，表明从此点开始器件进入反向雪崩击穿。TESTCURRENTIT(mA)测试电流，用来规定器件的反向击穿电压值。MAXIMUMCLAMPINGVOLTAGE@IPPVc(V)最大钳位电压，在规定的脉冲时间tr/tp内，承受的最大峰值电流Ipp是，加在器件上的最大电压值。PEAKPULSEC

7、URRENTIPP(A)最大脉冲电流，在规定的时间tr/tp内，器件所允许通过的最大峰值脉冲电流。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2