儿童重症监护病房病原菌与耐药性研究

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1、儿童重症监护病房病原菌与耐药性研究　　[摘要]目的调查我院2011年1月～2012年12月儿科重症监护病房（PICU）的病原菌分布及其耐药情况，为临床抗生素的合理使用提供实验室依据。方法采用珠海生物有限公司生产的黑马DL-96自动细菌鉴定与药敏系统进行菌种鉴定和药敏试验。细菌鉴定和药敏试验用的反应板都购自珠海生物有限公司。按美国临床及实验室标准化协会（CLSI）2008年标准操作。结果全年共分离出病原菌287株，其中革兰阴性杆菌201株，占70.03%，革兰阳性球菌72株，占25.09%，真菌14株

2、，占4.88%。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）产生率分别为71.01%和66.67%，且对环丙沙星、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南最为敏感。结论我院的PICU病房中的病原菌以革兰阴性杆菌为主，其中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌占比最大，分别为24.04%、25.25%。这些细菌对常用的抗菌药物表现为高度的多重耐药，临床医生应根据细菌菌种及耐药性合理地选择抗菌药物。[关键词]儿科重症监护病房；肺炎克雷伯菌；大肠埃希菌；超广谱β-内酰胺酶；多重耐药医院性获得性细菌性感染；最小抑菌浓度

3、[中图分类号]R446.5[文献标识码]B[文章编号]71673-9701（2014）04-0120-03目前，由于临床上广谱抗生素、免疫抑制剂和激素的大量使用，细菌的耐药趋势日益严重。PICU的患者由于年龄较小，免疫功能发育不完善，侵入性操作所致的皮肤屏障破坏和长期住院等因素，较易发生医院性获得性细菌性感染，其耐药问题日趋严重[1]。并且，由于患儿病情危重，多数无法获得病原学依据，因此，病原菌分布和耐药趋势监测对PICU患儿早期经验性治疗具有重要的指导意义。为了解我院PICU感染病原菌的分布和耐药

4、情况，现对2011年1月～2012年12月PICU的送检标本进行回顾性分析，以期对临床的经验性治疗提供依据。1资料与方法1.1一般资料2011年1月～2012年12月我院PICU患儿的各种标本共计1347例，分别为痰液、粪便、尿液、血液、各类穿刺液、脓液和分泌物等，其中以深部痰液最多，共有1077例，占79.96%。1.2仪器和方法7采用珠海生物有限公司生产的迪尔DL-96自动细菌鉴定与药敏系统进行菌种鉴定和药敏试验。细菌鉴定和药敏试验用的反应板都购自珠海生物有限公司。按美国临床及实验室标准化协会（

5、CLSI）2008年标准操作。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，产ESBLs大肠埃希菌ATCC35218。每周做一次室内质控，同一患儿在1周内出现相同的菌株，可视为同一菌株，不计入菌株总数，也不重复进行药敏鉴定。1.3ESBLs菌株的表型初筛试验用肉汤稀释法对测试菌进行头孢噻肟（1μg/mL）、头孢曲松（1μg/mL）、氨曲南（1μg/mL）三代头孢菌素的最小抑菌浓度（MIC）检测，可以选择一种或两种或三种抗生素的方式进行检测。以三种抗生素中有一种MIC≥2μ

6、g/mL判定为有ESBLs产生可疑。1.4ESBLs菌株的表型确证试验用肉汤稀释法对测试菌同时进行头孢噻肟（0.25～64）μg/mL与头孢噻肟/克拉维酸（0.25/4～64/4）μg/mL和或头孢他啶（0.25～128）μg/mL与头孢他啶/克拉维酸（0.25/4～128/4）μg/mL的MIC，以MIC降低3个以上对倍稀释度（8μg/mL）即可判定为产ESBLs株。1.5统计学分析全部数据采用SPSS软件包处理，计数资料用%表示，组间比较采用χ2检验，P7　　PICU是抢救危重患儿的治疗场所。我

7、院PICU患儿多由其他科室或外院转入，且大多病情危重，有机体免疫功能降低、侵袭性操作史等，因此，PICU的医院感染发生率明显高于普通病房患儿[4]。本次研究显示，PICU的送检标本阳性率达21.31%，以深部痰液分离的病原菌较多。287株病原菌中革兰阴性杆菌检出率高达70.03%，其次为革兰阳性球菌和真菌，分别为25.09%和4.88%；而革兰阴性杆菌中又以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌为主（本次研究暂不讨论鲍曼不动杆菌）。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是寄生于口咽部和肠道的条件致病菌，一旦机体免

8、疫力下降，这些细菌就会趁虚而入，引起机体某些部位的感染[5]。近些年来，由于临床上大量使用β-内酰胺类药物，致使β-内酰胺类的耐药菌株逐渐增加[6]。最常见的产β-内酰胺酶的细菌是肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，另外还有不动杆菌、铜绿假单胞菌等（本次研究暂不讨论）。这些细菌可以产生头孢菌素水解酶AmpC，并可以质粒形式在细菌间传播，导致其耐药性迅速扩散[7]。我院PICU耐β-内酰胺类药物的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率分别为71.01%和66.67%，均高于文献报道[8