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时间:2017-12-30
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1、05199603001V1超敏肌钙蛋白T急诊(TroponinThsSTAT)05092728190100测试l本试剂盒适用的分析仪主要用途该免疫测定法适用于人血浆和血清肌钙蛋白T体外定量测定。超敏ElecsysTnThsSTAT测定可作为急性冠状动脉综合症坏死的辅助诊断,如急性心肌梗死。同时也是急性冠状动脉综合症病人的危险分层和慢性肾功能衰竭病人的心肌危险性的指标。另外,还可用于选择对cTnT增高更有效的治疗和干预方法。Elecsys和cobase免疫分析仪均采用了电化学发光免疫法。临床应用肌钙蛋白T(TnT)是调节横纹肌收缩的一种物质。尽
2、管TnT的功能在所有横纹肌都一样,但心肌产生的TnT(cTnT,分子质量39.7kD)与骨骼肌TnT并不同。由于组织特异性高,心肌肌钙蛋白T(cTnT)是心肌损伤的特异性和高敏感性的标志物1。心肌肌钙蛋白T在心肌梗死后约3-4小时释放并持续2周左右2,3。相比ST段抬高型心肌梗死(STEMI),心肌肌钙蛋白对非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)的诊断更有价值。根据心肌梗死的新定义,当血中心肌肌钙蛋白的水平高于参考值(正常人群)的第99百分位点值,并有心肌缺血的表现(症状、ECG的改变或影像学结果)时,则可诊断为心肌梗死。这就要求肌钙蛋白的检
3、测方法在99百分位点的不精密性(变异系数)小于等于10%4。心肌肌钙蛋白T(cTnT)是能预测急性冠状动脉综合症短期、中期甚至长期结局的一种独立的预后诊断标志物。另外,多中心实验研究(4个中心实验室,共7000例患者)表明,心肌肌钙蛋白T也可用于评估患者的溶栓疗法(GPb//Ⅲa抑制剂,低分子量肝素)10,11,12,13,14成功与否。在非ST段抬高型急性冠状动脉综合症诊断和治疗的新治疗导则中,心肌肌钙蛋白是诊断心肌损伤的主要标志物15,16。临床症状稳定的患者血中也可测得低浓度的肌钙蛋白T,例如缺血或非缺血心力衰竭17,18,19,20,
4、心肌病21,肾功能衰竭22,23,24,25,26,27,28,脓毒症29和糖尿病30。肌钙蛋白增高的水平与冠状动脉疾病的严重程度和不良预后有关(不依赖促钠肽(BNP或NT-proBNP))17,18,31,32。低浓度的肌钙蛋白T是心血管事件(包括初发和再发的心房颤动)的独立预测指标33。血中cTnT浓度增高也可见于其他疾病,如心肌炎34,心脏挫伤35,肺栓塞36和药物引起的心脏毒作用37。不同情况下,其他诊断指标如肌红蛋白、CK-MB、NT-proBNP、PLGF和CRP可与肌钙蛋白T结合对疾病进行诊断和预后的判断31,38,39。Ele
5、csysTnThsSTAT超敏检测法采用了两个针对人cTnT的特异性单克隆抗体40,41。这两个抗体由228个氨基酸组成,可识别位于心肌肌钙蛋白T中心的两个抗原表位(氨基酸位125-131和136-147)。超敏ElecsysTnTSTAT定标品(ElecsysTnThsSTATCalSet)含有人心肌肌钙蛋白T的重组体(rec.hcTnT)。该重组体是从以人cTnT异质体3基因为媒介的E.coliBL21的细胞培养中分离的。发酵后,用超声使细胞破裂,离子交换层析纯化rec.hcTnT。经SDSPAGE,Western印迹法,免疫活性和蛋白含
6、量的测定对其进行分析42。检测原理夹心法,总检测时间:9分钟l第一次孵育:50μl标本、抗cTnT的生物素化特异性单克隆抗体和钌(Ru)a标记的cTnT特异性单克隆抗体一起孵育,形成抗原抗体夹心复合物。l第二次孵育:添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育,通过生物素和链霉素的相互作用,复合体与磁珠结合。l将反应液吸入测量池中,通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压,使复合体化学发光,并通过光电倍增器测量发光强度。l仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果,试剂条码提供标准曲线(5点校
7、正)。a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex(Ru(bpy){}三联吡啶钌试剂-工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒(透明瓶盖),每瓶12ml;包被链霉素的磁珠微粒,0.72mg/ml;防腐剂。R1生物素化的抗cTnT单克隆抗体(灰盖),每瓶14ml;生物素化的抗cTnT抗体(鼠)浓度2.5mg/L,磷酸缓冲液100mmol/L,pH6.0;防腐剂;抑制剂。R2Ru(bpy)32+标记的抗cTnT单克隆抗体(黑盖),每瓶,14ml,钌标记的抗cTnT2008-12,V1中文9/9Elecsys和cob
8、ase分析仪05199603001V1超敏肌钙蛋白T急诊(TroponinThsSTAT)单抗(鼠)浓度2.5mg/L,磷酸缓冲液100mmol/l,pH6.0;防
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