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时间:2017-12-29
《低浓度异氟醚对新生sd鼠海马神经元凋亡、增殖及脑源性生长因子表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、麻醉学基础研究低浓度异氟醚对新生SD鼠海马神经元凋亡、增殖及脑源性生长因子表达的影响中山大学附属第二医院麻醉科510120彭书崚王寿平张静目的:研究低浓度异氟醚暴露对新生SD幼鼠海马神经元凋亡,神经增殖及脑源性生长因子表达的影响。方法:制作幼鼠吸入麻醉模型,用免疫组化法检测激活型—caspase3的表达标记凋亡神经元,用腹腔注射5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)结合免疫组化方法标记海马齿状回增殖神经元,用westernblot方法检测脑源性生长因子(BDNF)的表达。将64只出生5天的SD幼鼠采用完全随机设计分为3组:①实验组Ⅰ(n=20):
2、连续3天,每天吸入0.5%异氟醚3h,异氟醚吸入完毕后0day,3day,7day行单次Brdu腹腔注射(100mg/kg)标记各时间点增殖神经元,24h后用免疫组织化学法检测Brdu阳性的细胞,0day组同时用免疫组化法检测激活型—caspase3的表达;②实验组Ⅱ(n=12):连续三天,每天吸入0.5%异氟醚3h,异氟醚吸入完毕后0day,3day,7day迅速断头处死幼鼠,分离双侧海马,行westernblot检测BDNF的表达;③正常对照组(Con组,n=32),和各实验组等数量配对,除不吸入异氟醚外余处理与实验组相同。采用Imag
3、eProPlus6.0软件行图像采集及分析,SPSS11.5统计软件行数据整理及统计分析。结果:异氟醚暴露完毕后24h(PND8)海马CA1,CA3,DG区等部位结构完整,只可见极少量Caspase-3阳性细胞,与对照组相比,阳性细胞数无统计学差异(P>0.05)。BrdU标记后24h,BrdU免疫阳性细胞主要分布于齿状回下区。异氟醚暴露完毕后0day,3day,7day三个时间点,实验组齿状回BrdU免疫阳性细胞数目均较相应时间点对照组增加,差异有统计学意义(P>0.05)。用BandScan6.0灰度分析软件分析异氟醚暴露完毕后0day
4、,3day,7day三个时间点BDNF的表达量,发现0day,3day时实验组BDNF的表达量明显高于对照组(P>0.05),而7day时实验组和对照组BDNF的表达量未见差异。结论及讨论:本研究结果表明SD幼鼠在脑发育高峰期(出生5-7天)反复接受0.5%的异氟醚暴露不会促进海马神经元凋亡,但可增加海马齿状回神经元增殖,这种促增殖的效应能维持一周。在增殖的高峰期同时伴有脑源性生长因子表达的增加,这可能是异氟醚促进神经增殖的途径之一。关键词:异氟醚,海马,凋亡,增殖,脑源性神经生长因子,新生鼠
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