12味中药对灵芝菌液体培养的影响

12味中药对灵芝菌液体培养的影响

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时间:2017-12-29

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1、12味中药对灵芝菌液体培养的影响摘要观察中药对灵芝菌液体培养中生物量和胞外多糖的影响。采用将12味中药的水提取液分别加入培养基中接种培养,培养7d后测定生物量和胞外多糖。结果显示,板蓝根、茵陈、垂盆草3味中药能增加灵芝生物量和胞外多糖量;丹参、半枝莲、苦参对灵芝多糖没有大的影响,而对生物量有明显地增加;虎杖、黄芩、甘草、金银花、白花蛇舌草和连翘6味中药对生物量的增加有一定程度地抑制作用。关键词中药,灵芝,液体培养,多糖灵芝是一味传统中药,具有很好地增强体质,抵御疾病的作用。现代研究证明,灵芝中所含的灵

2、芝多糖和灵芝酸类物质能增强机体的免疫力,有抑制肿瘤,抗病毒,保肝和抗衰老作用[1~7]。为了定向地强化灵芝的疗效,我们将中药加到灵芝液体培养基中,观察灵芝对中药成分的转化作用和中药成分对灵芝菌丝体生长及代谢产物的影响。文中初步研究了12味中药对灵芝菌液体培养的影响,观察中药对灵芝菌生长和灵芝多糖产生的促进或抑制作用。1材料与方法111材料灵芝菌:江南大学生物工程学院保存的菌种。种子培养基:葡萄糖20g/L,玉米粉10g/L,麸皮粉5g/L。基础培养基:葡萄糖40g/L,蛋白胨4g/L,MgSO4017

3、5g/L,KH2PO4115g/L,VB110mg/L。中药材:购自无锡禾山药业集团。112方法11211药汁煎制称取中药材(已切片),加适量水浸泡1h,在电炉中煎熬,调整适当的加热速度,保持温和的沸腾状态。煮沸30min,倒出药汁,补加适量冷水于药渣中,再煮沸20min,倒出药汁。合并药汁,用8层纱布过滤,药汁用于灵芝液体培养。11212接种培养将药汁倒入250mL三角瓶中,加入基础培养基,溶解。121e灭菌30min。冷却后接入灵芝液体种,接种量10%。摇瓶条件:三角瓶250mL,装液量80mL,

4、温度30e,转速150r/min,培养时间为7d。11213生物量计算将培养液离心,沉淀用水洗2次,再离心,沉淀在105e烘干至恒重,称重得生物量。11214胞外多糖计算将经离心所得的发酵上清液合并,减压浓缩到发酵液体积的2/5~3/5,加95%乙醇至乙醇含量为30%,在冰箱中静置24h。离心,弃去沉淀,上清液再加95%乙醇至乙醇含量达到60%,在冰箱中静置24h。离心,沉淀用60%乙醇水溶液分散,再离心,弃去上清液,以此法清洗沉淀去除沉淀中夹带的少量单糖和低聚糖。沉淀洗2次。再次离心后的沉淀用蒸馏水

5、溶解并定容到25mL,然后用苯酚硫酸法测多糖含量。38食品与发酵工业FoodandFermentationIndustriesVol129No132结果211中药对生物量的影响21111不同品种中药影响的比较培养基中分别加12味不同的中药,接种培养后所得生物量如表1所示,其中的对照样为在不添加中药的基础培养基培养的结果,其他条件相同。由表1可见,加黄芩、虎杖、连翘、金银花、甘草的样品生物量比对照样低得多,说明这些中药对灵芝菌的生长可能存在抑制作用;板蓝根、丹参、半枝莲、垂盆草样品的生物量比对照样高得多

6、,说明这些中药对灵芝菌的生长可能有一定的促进作用。表1中药对灵芝的生物量的影响对照R1isatidisH1artenisiaeScopariaeR1salviaeMiltiorrhizaeH1scutellariaeBarbataeR1sophoraeFlavescentisH1sedi中药用量@102/g#mL-10121512151215121512151215生物量@102/g#mL-11178313111912155213021112151R1scutellariaeRhizomapolygo

7、niCuspidatiFructusforsythiaeFlosloniceraeH1oldenlandiaDiffusaR1glycyrrhizae中药用量@102/g#mL-1121512151215121512151215生物量@102/g#mL-1011901340148015811160123注:R1isatidis:板蓝根;H1artenisiaeScopariae:茵陈;R1salviaeMiltiorrhizae:丹参;H1ScutellariaeBarbatae:半枝莲;R1soph

8、oraeFlavescentis:苦参;H1sedi:垂盆草;R1scutellariae:黄芩;RhizomapolygoniCuspidati:虎杖;Fructusforsythiae:连翘;Floslonicerae:金银花;H1oldenlandiaDiffusa:白花蛇舌草;R1glycyrrhizae:甘草。21112中药用量的影响在基础培养基相同的条件下,改变中药的用量,灵芝的生物量也受到影响。结果如图1(a、b、c)所示。从图1可见,半枝

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