细菌素及产细菌素菌株的研究概要.doc

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1、毕业设计文献综述生物科学细菌素及产细菌素菌株的研究概要摘要:本文主要综述了目前细菌素研究领域产细菌素菌株的几种研究方法,了解其主要方法以及作用,分析其优缺点,最终选取适合本实验的方法。关键词:细菌素,菌株,研究方法引言细菌素是由微生物通过核糖体途径合成的肽类抗生素。由于该物质能够抑制其他微生物的生长,并旦具备传统抗生素没有的优势,因而成为人们研究的焦点N1o人们已从不同生态环境2。】中筛选到产细菌素的菌株,如新鲜牛奶、发酵奶制品、豆芽、泡菜、香肠和动物肠道等。细菌素由于其本身的特性而广泛地应用于医疗、食品防腐、抗病原真菌、细菌分类、流行病菌系的鉴定和植物病害

2、的生物防治,所以细菌素的研究有着广泛的理论意义和应用价值[成。1细菌素及其应用价值细菌素一般定义为:由细菌产生的通常只作用于与产生菌同种或亲缘关系很近的种的其他菌株的一种蛋白类抗菌物质。它是一种多肽或多肽与糖及脂的复合物,但许多广谱细菌素的发现,使得细菌素的概念得到了扩大。目前国内外对细菌素的研究较深入,已经发现了几十种细菌素,已被鉴定的细菌素有Nisin、Lactacin>Lactocin等(杨洁彬等,1996),其中已被广泛应用的是乳酸链球菌素(Nisin),也称尼生素。细菌素与抗生素都由微生物产生,用量都很小,都具有一定的抗菌谱,能较强地抑制甚至杀死其

3、他微生物。细菌素与抗生素的根本差别是:大部分细菌素只对近缘关系的细菌有损害作用,而且无毒、无副作用、无残留、无抗药性,同时也不污染环境。所以,细菌素的使用,可以部分减少甚至取代抗生素的使用。Ivanova等对保加利亚传统饮料Boza研究中,得到一株乳酸乳球菌B14,其产生的类细菌素对亲缘相近的乳酸菌具有广泛的抑制作用,而且对大肠杆菌也有一定的抑制作用,但对其它G.无作用囚。细菌素对一定范围的微生物有抑杀作用,通过抑制芽泡萌发,在细菌细胞膜上形成亲水孔道等方式,导致细胞F1溶而死亡。细菌素的这种特性使细菌素具有广泛的应用价值。细菌素在饲料中的应用:细菌素由于具

4、有一定的抑菌能力且抑菌谱较窄,因而可防止饲料本身被沙门氏菌等致病菌污染,防止致病菌对•动物的危害U,J;细菌素在医疗上的应用:研究证实Nisin作用的靶位点与万古霉素相同,而且以Nisin为主要形式的羊毛硫细菌素可治疗老鼠葡萄球菌引起的传染性疾病和人类的瘗疮[⑵;细菌素在生物防治上的应用:它的应用包括以下几个方面:(1)利用不同寄主来源的细菌素无毒菌株进行生物防治。(2)克隆植物病原细萌素基因,获得转细菌素基因的抗病植物o(3)利用细萌素特征研究植物病原菌田间自然种群的动态〔3140同化学防腐剂相比Nisin作为一种纯天然生物防腐剂具有也很多优点。Nisin

5、也可以运用到酿造工业上〔16Nisin可以添加到发酵罐中防止和控制污染,可以代替影响酵母活力的酸洗液,可用来洗涤种酵母消除污染细菌。在熏肉中接种能产生抗李斯特菌素的细菌,经过一段时间后测定pH为5.7,李斯特菌含量水平明显降低l,7J8Jo2菌株的研究方法2.1菌株筛选与鉴定产细菌素萌株筛选与鉴定的方法有许多种,但鉴定的方法主要是形态学鉴定中的菌株形态观察、革兰氏染色、芽抱染色和生理生化鉴定以及16SrDNA的序列分析等。岳喜庆、郭晨等用牛津杯筛选法从发酵泡菜中筛选到一株对大肠杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和米曲霉具有抑制作用的乳酸菌BC-r2

6、11o邓艳美等用打孔法检测待检菌发酵上清液中是否含有抑菌物质[洵。闵钟煜,朱光泽,岳喜庆等初筛用点种法,复筛用琼脂扩散法筛选出一株具有良好的抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、志贺氏菌以及沙门氏菌的乳酸菌阪纨25】。除此之外细菌素筛选的方法还有平板对峙法、滤纸片法、双层平板法等。2.2理化特性的研究细菌素理化特性的研究一般分为细菌素对热的稳定性、细菌素对酸碱的稳定性、细菌素对蛋白酶的敏感性、细菌素对表面活性剂的稳定性,其中细菌素对蛋白酶的敏感性也是证明抑菌物质是否是蛋白质的一种方法。程万鹏,尚楠等对一种生产抗猪链球菌细菌素的菌株屎肠球菌LPL

7、420P06进行了细菌素对热的稳定性、细菌素对酸碱的稳定性、细菌素对蛋白酶的敏感性、细菌素对表面活性剂的稳定性等生物学特性研究,并最终得出该菌所产的细菌素具有良好的热稳定性,在90°C30min热处理的条件下仍能保持90%以上的活性;易被缺蛋白酶、蛋白酶K、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶失活,表明该细菌素是一类蛋白类物质;在pH5〜9范围内37°C4h处理,活性保持稳定2.3发酵条件的优化2.3.1有机溶剂对细菌素产量的影响除了培养基中的碳源、氮源和无机盐对细菌素产量有影响外,有机溶剂对细菌素的产量也有一定的促进作用。庄绪亮等研究了不同发酵条件下Tween80对

8、乳酸链球菌SM526产Nisin的影响〔刀。乙酸作为

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