花青素含量测定方法的建立（盲审稿）.doc

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1、火棘果中原花青素含量测定方法的建立摘要：采用香草醛-盐酸法对火棘提取物中原花青素含量进行测定，考察了标准物、光照条件、反应时间、反应温度、盐酸浓度、香草醛浓度等因素对原花青素与香草醛显色反应的影响。结果表明，香草醛-盐酸法测定火棘提取物中原花青素含量的适宜条件为：1mL提取液，6mL4％香草醛甲醇溶液以及3mL浓盐酸，混匀后不避光条件下30℃水浴保温10min后，以儿茶素为标准品，波长500nm处测定吸光度值。该测定方法具有良好的重复性、稳定性、重现性，回收率较高。关键词：火棘，原花青素，香草醛盐酸法，含量测定分

2、类号:TS201.2[著者标引]文献标识码：A文章编号：栏目信息：DeterminationofproanthocyanidinscontentinPyracanthafortuneana作为拉丁学名，应该用斜体标注，下文已逐一修改。fruitAbstract:Vanillin-HClassaywasadoptedtodeterminethecontentofproanthocyanidinsinPyracanthafortuneanaextract,.Severalparameters,suchasstanda

3、rd,light,reactiontime,reactiontemperature,HClconcentrationandvanillinconcentrationthataffectingthecolorreactionofproanthocyanidinwereinvestigated.Theresultsshowedtheappropriatereactionconditionswereasthefollowing,1mLofpyracanthaextract,6mLof4g/100mL与中文摘要单位统一。

4、vanillinsolutionand3ml3mLofconcentratedHClinmethanolrespectively,afterblendingthereactionwascarriedoutat30℃for10minandthenmeasuredtheabsorbanceat500nm.AssesmentAssessmentofthemethodbystatisticsshowedthemethodhasgoodrepeatability,stability,reproducibilityandhi

5、ghrecoveryrate.Keywords:pyracanthaPyracanthafortuneana;proanthocyanidins;Vanillin-HCl;assaying火棘（Pyracanthafortuneana）属于蔷薇科苹果亚科（Maloideane），是一种药食两用多用途常绿野生灌木，在我国有7个种属，主要分布于东南、西南和西北部，分布广泛，资源丰富，其乙醇提取物含丰富的原花青素，具有清除自由基[1]、抗氧化[2]、抗病毒[3]、抗细菌[4,-5]和抑制肿瘤[6]等多种功效，广泛应用于

6、食品、药品及化妆品等领域，市场前景广阔。原花青素是一类多酚类混合物，化学成分复杂，其含量测定目前国际上并无统一的方法。铁盐催化比色法[7]在国外最早是由Swain和Hillis[8]提出，其反应特征性显著，操作简便，但重现性较差；正丁醇—盐酸法[9]选择性高，但受多酚结构的影响较大，与儿茶素单体不反应；HPLC法[10]测得的结果相对准确，但其所需单体的获得操作复杂，不易得到；HPLC-MS法[11]只能测得原花青素的相对含量，不能作为定量分析的方法；香草醛-盐酸法[12]对缩合单宁的选择性虽然不是很好，但其对原

7、花青素的反应灵敏度高，重现性好。鲍俊竹[13]、姚开等[14,-15]采用香草醛-盐酸法、香草醛-硫酸法和正丁醇-盐酸法3种方法测定葡萄籽提取物中原花青素含量，对其结果进行比较，表明香草醛-盐酸法具有较高的准确度和精密度，优于其它方法。因此香草醛盐酸法较适用于低浓度原花青素样品测定。目前香草醛法主要用于葡萄籽、蔷薇、莲子皮等原花青素的含量测定，其操作方式较多，差别较大[16-22]。国内外关于火棘中原花青素的研究甚少，对火棘中原花青素的含量测定方法的研究更未见报道，因此有必要优化建立专属火棘中原花青素含量测定的方

8、法，这必将为火棘资源的进一步开发提供参考。前言部分还需补充本实验用什么方法，实验目的和意义是什么。1材料与方法1.1材料与仪器火棘提取物实验室自制；实验用水均为去离子水；无水乙醇、甲醇、盐酸、香草醛均为分析纯；(+)-儿茶素标准品、原花青素标准品购自上海金穗生物科技有限公司。万分之一电子天平德国赛多利斯公司；隔膜真空泵GM-1.0A天津市沸腾实验设备有限公司；集热式磁力加