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1、植物的组织培养技术1.菊花的组织培养 植物组织培养的基本过程细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在形态､结构和生理功能上出现_____________,此即细胞分化 脱分化:由高度分化的植物组织或细胞产生____________________的过程,称为植物细胞的脱分化 再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以______________________,即再分化稳定性的差异愈伤组织重新分化成根或芽等器官影响植物组织培养的因素 材料的选择:植物材料的种类及材料的年龄,________时间的长短均会影响培养状况,菊花的组织培养一般选择______
2、__植株的________________所需的营养､环境:植物组织培养需要适宜的培养基,常用的是MS培养基,其主要成分包括________(如N､P､K等),__________(如B､Mn等),________(如维生素及________等),在制备好的MS培养基中常需添加________保存未开花茎上部新萌生的侧枝大量元素微量元素有机物蔗糖植物激素植物激素的作用:植物激素中生长素和细胞分裂素是启动12___________､13________和14________的关键性激素,这两种激素的___________､F16______________以
3、及17_____________等,会影响实验结果其他因素:18________､19________､20________等条件细胞分裂脱分化浓度使用的先后顺序用量的比例再分化ｐＨ温度光照实验操作 制备MS固体培养基:可分为配制各种母液和配制________及灭菌,灭菌常用方法是________外植体消毒:将外植体用流水冲净后,先用____________________消毒,再用无菌水冲洗,然后用质量分数为________________溶液消毒,最后再用无菌水清洗,漂净消毒液培养基高压蒸汽灭菌体积分数为70%的酒精0.1%的氯化汞接种:接种时要始终在点燃
4、的酒精灯旁进行,对接种工具要________灭菌｡将外植体插入培养基中时应注意方向,不要________,每瓶接种6～8块外植体 培养:接种后的锥形瓶最好放入________中培养,培养期间应定期________,培养温度控制在____________,且每日________________灼烧倒插无菌箱消毒18°C～22°C用日光灯照12h2.月季的花药培养被子植物的花粉发育 花粉是________的生殖细胞,是由花粉母细胞经过________形成的 被子植物花粉的发育要经历_____________､单核期和________等阶段,其中单核期又分为____
5、____和________两个时期,双核期包括花粉管细胞核和________细胞核单倍体减数分裂小孢子四分体时期双核期单核居中期单核靠边期生殖两种途径间并无绝对界限,主要取决于培养基中________________激素的种类及其浓度配比影响花药培养的因素诱导花粉植株能否成功及 诱导成功率高低,受多种因素的影响,其中________与__________________是主要的影响因素 不同植物的诱导成功率很不相同｡同一种植物的亲本植株的____________________对诱导成功率也有 直接影响｡一般来说在__________期细胞核________
6、________的时期花药培养成功率最高,为挑选该期花药,通常选择______________________的花蕾材料的选择培养基的组成生理状况单核由中央移向细胞一侧完全未开放实验操作 材料的选取:选择花药时,一般要通过________来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期,最常用的方法有________,但某些植物的花粉细胞核________,需采用___________________,这种方法能将花粉细胞核染成___________色镜检醋酸洋红不易着色焙花青-铬矾法蓝黑材料的消毒:通常将选取的材料先用_________________浸泡约30s,在无
7、菌水中清洗,再用___________________溶液消毒2～4min,最后用________冲洗3～5次 接种和培养 灭菌后的花蕾:需在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上培养温度控制在25°C左右________后才需光照花药培养中,特别是通过________形成的花粉植株,常会出现__________的变化,因此需对培养出来的植株作进一步鉴定和筛选体积分数为70%的酒精质量分数为0.1%的氯化汞无菌水幼小植株形成愈伤组织染色体倍性考点1菊花的组织培养 1.实验原理:细胞的全能性 (1)植物体内已经分化的细胞,在离体状态和一定的条件下,
8、可以发育成完整的植株,其过程如下:(2
