植物组织培养技术课件.ppt

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1、专题3植物组织培养技术思考1、原理:2、必要条件：植物细胞的全能性细胞离体一定的营养物质、激素和其他外界条件外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官植物组织培养技术3、细胞的全能性①定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因已分化的植物细胞，仍具有全能性③实例受精卵>生殖细胞>体细胞④全能性的比较:1）、培育无病毒植株2）、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品

2、的原料）4)、基因工程中亦需到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用：3）、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题课题目标说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。课题重点与难点课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题1：菊花的组织培养一、基础知识1、植物的组织培养（1）细胞的分化①概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态

3、、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程②过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统③特点：（2）稳定性：细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的（3）全能性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能（1）持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度⑤原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果④结果：形成不同的细胞和组织2、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化植物细胞培养脱分化：指已经分化的植物器官

4、、组织或细胞,当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时,已停止分裂的细胞,又重新恢复分裂,细胞改变原有的分化状态,失去原有结构和功能,成为具有未分化特性的细胞。再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和芽,形成完整植株,这一过程叫作再分化。愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞菠萝的愈伤组织愈伤组织2、影响植物组织培养的因素（1）植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花

5、的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基MS培养基主要成分包括：A、大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物:如氨基酸、烟酸、肌醇、维生素，蔗糖等D、植物激素①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素（3）植物激素的影响使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但

6、不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞即分裂也分化同时使用分化频率高②生长素和细胞分裂素作用生长素细胞分裂素：>有利于根的分化生长素细胞分裂素：<有利于芽的分化，抑制根的分化生长素细胞分裂素：＝促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日用日光灯照射12h生长素细胞分裂素：<讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？答：微量元素和大量元素提供植

7、物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。植物组织培养过程离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化芽根植物体组织培养实验过程简图移栽制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培二、实验操作移栽MS培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制:MS培养基含有十几

8、种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表)（2）MS（1000mL）培养基的配制:按比例分别取适量各种成分的母液，加入烧杯，称取蔗糖30g，琼脂7g，加水并加热使琼脂溶解，按照需要的浓度分别加入激素，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl溶液调节pH至5.8~6.