植物组织培养技术.ppt

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1、植物组织培养技术1一、植物组织培养的概念及分类植物组织培养（planttissueculture）的原始/狭义概念：由源于植物各种器官的培养材料（外植体）在离体条件下增殖形成的愈伤组织的培养。植物组织培养的广义概念：植物及植物器官、组织、细胞和原生质体等植物各种离体生活部份的培养。植物组织培养也称植物离体培养（cultureinvitro）。2植物组织培养的分类可以归纳如下：植株培养胚胎培养器官培养培养材料组织培养（包括愈伤组织培养）细胞培养原生质体培养固体培养培养方式振荡培养液体培养旋转培养静止培养（包括纸桥培养）

2、3三、植物组织培养的应用无性系的快速繁殖（包括脱毒苗繁殖）花药培养与单倍体育种体细胞杂交和突变体筛选植物次生代谢产物的生产二、植物组织培养的生理依据4四、植物组织培养的操作技术决定植物组织培养成败与效果的关键因素有二：培养基、无菌操作。植物组织培养技术中最关键的技术是无菌操作技术！根据操作的先后顺序，可以把植物组织培养过程分以下三大步骤：培养基配制、接种、培养。研究方法：查阅资料、实验（正交试验法）5植物组织培养过程培养基配制接种培养（取材）接种室、超净工作台清洁、消毒植物材料的表面消毒无菌操作（接种）61、培养基配

3、制（1）培养基母液的配制植物组培常用基本培养基有：MS、White、B5、N6等无机盐：大量元素：×100微量元素（Ca盐、Fe盐单配）：×1000有机物：维生素（VB1，等）：×100-1000氨基酸（甘氨酸，等）：×100-1000生长物质：2,4-D、NAA、IBA：×500-10006-BA、KT、ZT：×500-10007（2）培养基的配制吸取母液加入琼脂：0.6-0.8%加热溶解加入蔗糖：2-3%定容调pH（MS=5.8）分装（3）培养基的消毒排冷气、放气出芽、生根培养基的差别：（1）CTK/生长素（2）

4、蔗糖（3）琼脂82、接种（1）取材生长季节取材晴天取材内部组织（2）接种室、超净工作台清洁、消毒操作者接种室超净台9（3）植物材料的表面消毒常用消毒剂：70-75%乙醇：30s0.1-0.2%升汞：5-10min2-5%次氯酸钠：5-10min饱和漂白粉上清液：5-10min（4）无菌操作（接种）接种工具：镊子、手术刀、剪刀接种区域：接种方法：叶片、顶芽、茎段无菌苗的培育！103、培养温度：光照：愈伤的培养、生根；光自养培养湿度：11五、试管苗移栽晾苗：炼苗：两段生根法移栽：温度、湿度的控制返回12