乳牙牙髓干细胞库的构建.docx

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1、乳牙牙髓干细胞库的构建干细胞是一类具有自我更新、高度增殖与多向分化的细胞。根据干细胞所处的发育阶段，干细胞库分为胚胎干细胞库和成体干细胞库2种。进行胚胎干细胞研究必须破坏胚胎，而胚胎是人尚未成形时在子宫的生命形式，因此，胚胎干细胞的研究一直颇具争议遭到一部分人的反对。成体干细胞已从成年个体不同组织中成功分离，该细胞通过分裂维持自身细胞群大小，经诱导后又可进一步分化为各种不同的组织细胞，继而构成机体中各种组织器官。作为种子细胞，干细胞可以修复和重建受伤或病变的多种组织器官，因此，干细胞库/细胞银行的设想为干细胞能及时对病变部位和外伤受损处的再生性治疗提供了新思路。如何以最简单、无创的途径获取种

2、子细胞已成为学者们关注的焦点。目前，已有研究探讨应用成人牙髓干细胞取代骨髓基质干细胞治疗因脊髓损伤而导致瘫痪的患者。在儿童脱落的乳牙中，含有丰富的乳牙牙髓干细胞（stemcellsfromhumanexfoliateddeciduousteeth，SHED）。最近的研究表明：SHED也具有多向分化的能力，相对于从个体阻生第三磨牙或因正畸拔除的前磨牙中获取干细胞的途径来说，脱落乳牙是一个更容易获得干细胞的途径。国外已有学者对SHED库进行了研究，并由此产生了多家机构建立SHED库。美国BioEden公司在德州创立“乳牙银行”（BabyToothCellBank）并在英国（面向欧洲）和泰国（面向

3、东南亚）建立了国际实验室，以构建SHED储存库。日本广岛大学于2005年建立了“ThreeBrackets”研究所，这是日本第一家牙齿银行（ToothBank），并于2008年与台北医学大学实验室合作建立台湾第一家DPSC库，其中就包括SHED；随后，在2007年，名古屋大学也建立起类似的实验室。在北欧挪威，Norwegian牙齿银行已经收集超过10万颗乳牙样本，并且建立起宣教的机构以普及干细胞储存意识。1建立SHED库的设想1.1SHED的生物学特性SHED与其他组织来源的干细胞在生物学特性上有很多相似之处。Gronthos等对牙髓干细胞（dentalpulpstemcell，DPSC）的

4、克隆形成率进行了研究，与骨髓基质干细胞（bonemarrowstromalcell，BMSC）比较后发现：SHED中DPSC的克隆形成率明显高于骨髓来源的BMSC，这就表明DPSC具有较BMSC更高的增生能力和自我更新能力。Miura等发现：从1颗脱落前牙取材的每12~20个细胞就可以形成黏附克隆集落，这是间质干细胞增殖的典型表现。进一步的实验结果表明：与BMSC和DPSC相比较，SHED有更高的增殖能力。DPSC在不同诱导剂的作用下，可分化为成牙本质细胞、脂肪细胞、软骨细胞和神经样细胞等多种细胞。研究人员主要集中研究SHED的体内外成骨的潜能，如Cordeiro等利用SHED与生物可降解支

5、架与人牙齿切片复合移植于免疫缺陷小鼠，14~28d后将移植物进行免疫组织化学的检查，结果发现牙本质涎蛋白表达阳性，推断SHED在体内能分化为成牙本质样细胞。在成脂、成软骨和成神经诱导方面均有研究证实SHED具有多向分化的潜能，为其在体内植入SHED使受损或衰退的组织、器官改善或恢复功能提供了理论依据。1.2SHED细胞库的优点从伦理道德学角度考虑：胚胎干细胞的研究对胚胎的破坏作用使其颇具争议，遭到一部分人的反对，而SHED是成体干细胞，不受伦理学的限制。取材方面：从个体脱落的乳牙获取SHED较为简单可行，且对供体（儿童）伤害最少，其父母也较易接受；个体化获取和保存SHED来进行自体移植再生性

6、治疗，能最大限度地降低免疫排斥和疾病交叉感染的风险；此外，先于病变发生而储存干细胞，为个人提供了终身保障，这也是建立干细胞库的指导思想之一；SHED库更可用于供体近亲，如祖父母、父母和兄弟姐妹等。Arora等的研究表明：SHED库的储存费用仅仅为脐带血细胞库的1/3。在多向分化能力和临床应用潜能方面，SHED等成体干细胞与脐带血来源的干细胞互为补充，脐带血干细胞能提供血液中的主要细胞如红细胞、白细胞和血小板，用于治疗多种血液疾病，而SHED则可在软硬组织再生方面起作用，这是造血干细胞无法比拟的。2建立SHED库的技术要点医患双方经过充分沟通并了解双方的权利和义务后，签署“干细胞自体储存协议书

7、”并交付一定的费用，收集供体脱落的乳牙，从乳牙牙髓中培养分离SHED存入自体储存库，干细胞所有权归存储者所有，其所存的干细胞只用于拥有者本人或经拥有者同意转让给其他家庭成员和无关第三人。建立SHED库要经历乳牙收集、SHED的分离和储存3个步骤。2.1乳牙的收集在收集乳牙前应首先对该乳牙的牙体和牙髓状况进行判断，选择无龋和无牙髓炎症的乳牙，这是成功获取SHED的前提。因此，Arora等制定了建立SHED库收集