高考生物 专题56 DNA和蛋白质技术 植物有效成分的提取课件 新人教版选修.ppt

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1、专题5、6DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取本节目录回归教材•夯实基础知能演练•强化闯关高频考点•深度剖析回归教材•夯实基础基础盘点蒸馏水物理和化学DNA含量滤液(3)杂质的去除方案①利用DNA在不同浓度的_______溶液中溶解度的不同，通过控制其溶液的浓度去除杂质。②用木瓜蛋白酶去除_______。③用高温(60～75℃)使_______变性。(4)DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、_____________溶液可使DNA析出。(5)DNA的鉴定：将析出的DNA溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中，加

2、入二苯胺试剂，沸水浴加热，溶液变蓝。NaCl蛋白质蛋白质冷却的酒精二、多聚酶链式反应扩增DNA片段1．PCR原理在80～100℃的温度范围内,DNA发生_______,双螺旋结构解体,在温度缓慢降低后,DNA发生_______,DNA单链与_______通过碱基互补配对结合,耐高温的DNA聚合酶从____________开始延伸DNA链。2．PCR的条件缓冲溶液、DNA模板、2种_______、4种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶，同时要控制温度。变性复性引物引物的3′端引物三、血红蛋白的提取和分离实验1．常用的分离方法：_________

3、__法、凝胶电泳法等。2．基本原理(1)凝胶色谱法的原理：相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程____,流动____；相对分子质量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程____,流动____。(2)凝胶电泳法的原理：不同蛋白质的带电性质、______、形状和______不同,在电场中受到的作用力大小、______、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动_______和运动______不同。凝胶色谱短快长慢电量大小方向方向速度3．血红蛋白的提取和分离程序(1)样品处理红细胞的洗涤→___________的释放→分离血红蛋白溶液。(2

4、)粗分离——_______：除去样品中相对分子质量较____的杂质。(3)纯化：一般采用__________法对血红蛋白进行分离和纯化。(4)纯度鉴定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。血红蛋白透析小凝胶色谱四、植物有效成分的提取1．植物芳香油的提取(1)植物芳香油的主要化学成分：萜类化合物及其衍生物，具有很强的挥发性。提取方法有蒸馏、_______和萃取等。压榨水蒸气蒸馏法NaCl无水Na2SO4过滤压榨压榨过滤水萃取石油醚纸层析法知识导图高频考点•深度剖析考点一DNA的粗提取与鉴定

5、[考点突破]1．基本原理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。(2)DNA不溶于酒精溶液。(3)DNA不被蛋白酶所水解。(4)DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。2．DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解规律DNA溶解析出蛋白质部分发生盐析沉淀溶解NaCl溶液从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大3.DNA的析出与鉴定(1)析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为95%)，静置2

6、～3min，溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的DNA)，用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。(2)鉴定比较加入物质结果图示实验组均加入：①4mL二苯胺试剂②2mol/LNaCl溶液5mL丝状物(DNA)溶液逐渐变蓝对照组不变蓝特别提醒本实验用鸡血细胞作实验材料，不能用哺乳动物的成熟红细胞，原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核，但它可以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。对点突破1．(2011·高考江苏卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是()A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物

7、B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：选B。在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度最低，DNA存在于析出物中，故不能滤去析出物，A项错误；利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，进行相应操作，可在实验中去除部分杂质，B项正确；进行DNA鉴定时，加入二苯胺试剂后再经沸水浴才能出现蓝色，C项错误；用菜花作为实验材料时，要加入一定的洗涤剂和食盐，进行充

8、分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，D项错误。2．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的DNA的黏稠物(还含有许多杂质)分别处理如下：第一，放入0.14mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过