细胞贴壁原理.doc

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1、细胞贴壁原理悬浮细胞：细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，这类细胞称为悬浮细胞。如淋巴细胞。 贴壁细胞：在动物细胞培养过程中，必须有可以贴附的支持物表面，其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。 兼性贴壁细胞：有些细胞并不严格地依赖支持物，它们既可以贴附于支持物表面生长，但在一定条件下，它们还可以在培养基中呈悬浮状态良好地生长，这类细胞称之为兼性贴壁细胞。 贴壁细胞分为，上皮细胞型，成纤维细胞型，游走细胞型和多型细胞型，在显微镜下观察时，贴壁细胞在瓶底伸展

2、并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形或其它形态，而且晃动培养液时，细胞不动。 悬浮细胞漂在培养液中，呈圆形，晃动培养液时细胞也随着漂动  贴壁生长的细胞跟悬浮的细胞都有很多种。 活体体的细胞当离体置于体外培养时大多数均以贴壁方式生长，主要包括正常细胞和肿瘤细胞，比如成纤维细胞，骨骼组织（骨及软骨），心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞，分泌细胞，黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。 少数细胞在体外培养是悬浮生长，包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞，尤其是血液白细胞以及淋巴细胞 。体外培养贴壁细胞重要的生长特

3、点有：贴附和伸展以及接触抑制和生长的密度限制。贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。虽然血细胞如淋巴细胞在活体体并无聚集的倾向并在体外可于悬浮状态中生长，但是大多数的哺乳动物细胞在体和体外均附着于一定的底物而生长，在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑料等。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一种需要能量的过程，一般认为与电荷有关。据资料记载，37℃时在2min细胞之间即可形成键，该键可对

4、0.01%胰蛋白酶起作用且仅发生于细胞之间，而细胞与底物之间则无；8min后才有稳定的键形成。一些特殊的促细胞附着的物质（如层粘连蛋白、纤维蛋白、III型胶原、血清扩展因子等）可能参加细胞的贴附过程。这些促细胞附着因子均为蛋白质，存在于培养液尤其血清之中。在培养过程中，这些带阳电荷的促贴附因子先吸附于底物上，悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴附物质的底物附着，以后细胞将伸展成其原来的形态。。一般来说，从底物脱离下来的贴附生长型细胞，不能长期在悬浮中生长而将逐渐退变，除非这是一些转化了的细胞或恶性肿瘤细胞。另外，

5、经过无血清驯化后的细胞，会从贴壁生长转到悬浮生长，目前在生物工程制药领域，趋势是使用无血清的悬浮培养为主。体外培养细胞重要的生长特点有：贴附和伸展以及接触抑制和生长的密度限制。贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。虽然血细胞如淋巴细胞在活体体并无聚集的倾向并在体外可于悬浮状态中生长，但是大多数的哺乳动物细胞在体和体外均附着于一定的底物而生长，在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑料等。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细胞样或上

6、皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一种需要能量的过程，一般认为与电荷有关。据资料记载，37℃时在2min细胞之间即可形成键，该键可对0.01%胰蛋白酶起作用且仅发成于细胞之间，而细胞与底物之间则无；8min后才有稳定的键形成。一些特殊的促细胞附着的物质（如层粘连蛋白、纤维蛋白、III型胶原、血清扩展因子等）可能参加细胞的贴附过程。这些促细胞附着因子均为蛋白质，存在于细胞膜表面或培养液尤其血清之中。在培养过程中，这些带阳电荷的促贴附因子先吸附于底物上，悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴附物质的底物附着，以后细胞将伸

7、展成其原来的形态。一般来说，从底物脱离下来的贴附生长型细胞，不能长期在悬浮中生长而将逐渐退变，除非这是一些转化了的细胞或恶性肿瘤细胞。———摘自司徒镇强主编的细胞培养一书，具体容见1.2培养细胞的特性1、细胞贴壁原理     培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一种需要能量的过程，一般认为与电荷有关。据资料记载，37℃时在2min细胞之间即可形成键，该键可对0.01%胰蛋白酶起作用且仅发现于细胞之间，而细

8、胞与底物之间则无；8min后才有稳定的键形成。     一些特殊的促细胞附着的物质（如层粘连蛋白、纤维蛋白、III型胶原、血清扩展因子等）可能参加细胞的贴附过程。这些促细胞附着因子（或贴壁因子）均为蛋白质，存在于细胞膜表面或培养液尤其血清之中。在培养过程中，这些带阳电荷的促贴附因子先吸附于底物上，悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴附物质的底物附着，以后细胞将伸展成其原来的形态。一般来说，从底物脱离下来的贴附生长型细胞