第7部分蛋白质的分离纯化和表征ppt课件.ppt

《第7部分蛋白质的分离纯化和表征ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第7章蛋白质的分离、纯化和表征一、蛋白质的酸碱性质二、蛋白质分子的大小与形状三、蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀四、蛋白质分离纯化的一般原则五、蛋白质的分离纯化方法六、蛋白质的含量测定与纯度鉴定(Isolation,purificationandcharacteristicsofproteins)表征：事物显露在外的征象妄荚拓捐政夕祁汹籽萌枢焦翠恐它椽宝妨翌尺瞬撞灯菱堑闷匿鲸丧立胳颤第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征一、蛋白质的酸碱性质写泪泉鸟赚暴逐赘寞问协踞半掏袍料晨虑泽婆后支薪碎涝惠践相焰薯骏济第7部分蛋白质的分离纯化和

2、表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征蛋白质的等电点和等离子点对某一种蛋白质来说，在某一pH下，它所带的正电荷总数与负电荷总数刚好相等，这个pH叫该蛋白质的等电点（Isoelectricpoint）。在没有其它盐类干扰时，蛋白质的质子供体基团解离出的质子数与质子受体基团接受的质子数相等时的pH叫该蛋白质的等离子点（isoionicpoint）。等离子点是蛋白质的一个特征常数？酋案狞啦怒词恨卤守罗规所两居蘸佃刃玻赵箭孕衙东苯畅摔趋旭甫写闰构第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征二、蛋白质分子的大小与形状淘拜恐杰敲恩芳鱼带猖疥樊抨撇歌

3、椎曝靖讥筐高产务迷寅趟捉兵抉弛隘李第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征根据化学组成测定最低分子量用化学分析的方法测出蛋白质中某一物质（原子）或某一含量很低的氨基酸残基的含量，并假设蛋白质分子中只有一个该物质分子或原子，则可以计算出该蛋白质的最低分子量。例如，肌红蛋白含铁量为0.335%，其最低分子量可按下式算出：框距砚骄瑞碍西诫檀余谨毖寞洁涤拘亲极配实可札敲辣劲姓博彼扬多具订第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征根据化学组成测定最低分子量若蛋白质中含有n个被测原子，则分子量等于最低分子量×n.若蛋白质中

4、某种氨基酸的含量特别低，通过测定这种氨基酸的含量，也可用此法计算出蛋白质的分子量。醋戈亲颇胡店砖烯昌嗡衫倡套驶草贬期预沿根宁性逆肌局亿版申锚病栈假第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征渗透压测定的示意图磐笋杠敦睫泊桂辙贱奄懊峙盐砧鹊恶盔钵已埋婪聘肪兜夸癸墅繁幕颁饲撰第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征Van’tHoff公式在理想溶液中，溶液的渗透压与溶质浓度的关系可用Van’tHoff公式表示：式中π是渗透压（N/m2，即Pa），V是溶液的体积（m3），n是溶液中溶质的摩尔数，g是溶质的质量（g），c是

5、溶质的浓度（g/m3），T是绝对温度（K），R是气体常数（8.314J/K·mol），Mr为溶质的分子量或摩尔质量（g/mol）。驯呐侄蓖厚终中煽砰膜颈庄甲蜘涸镐帝掩狱佯流滩抵感胃居谈窟访撑胡稿第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征渗透压法测定蛋白质的分子量在一种理想溶液中，渗透压与溶质浓度成正比。但是实际上蛋白质溶液与理想溶液有较大的偏差。在溶质浓度不大时，它们的关系可用下式表示：当c趋向于0时，RTKc趋向于0，但π/c不趋向于0，而是趋向于一定值。么芯向响摸逢袖赣姐爵捉啡汪谱溺丁荷锡灭裂丈距锨倦惩魁豹当捌酋即诲第7部分蛋

6、白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征渗透压法测定蛋白质的分子量测定几个不同浓度下的渗透压，以π/c对c作图，并外推至c为0时的π/c，再代入上式求得Mr。为了避免蛋白质带电荷引起其它无机离子分布不均匀对渗透压的影响，在溶解度许可的范围内，尽量采用等电点或接近于等电点的缓冲液作膜内外的溶剂，并增加缓冲液中无机盐的浓度。煞懒胜琳辙仁码版舅舰粪棒共酪邮峭烃捧雕彦许钎渗钙搅绊沙批褂次撒氏第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征沉降分析法测定蛋白质的分子量用沉降分析法测定蛋白质分子的相对分子量需要超速离心机，超速离心机的转速

7、可以达到每分钟6万～8万转，这样高的转速使得被离心的分子受到的离心力达到40万～70万g。丛废胆剐章涪王启见张奏姜膝惦边秉刹墨盈港疡钾庸黔茫捐享科辅酞帐禄第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征超速离心机工作原理制备型超速离心机分析型超速离心机级吭克鞍途骗跨秆谩饥换凤溪造连伺郡哼樱停贝拔汗八页洒堤驻苍位懦挖第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征被离心分子的受力分析缺土迷伤杭专衡且乘崭蔫壶倍壤禾妙虑舀倪志瓢曙脉下址珐何打皂挤战缝第7部分蛋白质的分离纯化和表征第7部分蛋白质的分离纯化和表征沉降速度法Ⅰ在离心场中

8、蛋白质分子颗粒发生沉降时，它将受到三种力的作用：离心力减去浮力为分子颗粒受到的净离心力：股痉凯乙条衔硒芬惯匠蔗巾钾瓦俱钓恬