东芝生化应用培训ppt课件.ppt

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1、东芝生化应用培训2004年3月主要内容非线性定标方式的选用双波长的设定异常结果的分析常见问题的解答非线性校准方式的选用非线性校准方式的选用非线性校准方式的选用Logit-4：4参数对数Logit-5：5参数对数指数函数：5参数指数样条函数:三次方的样条函数非线性校准方式的选用非线性校准方式的选用非线性校准方式的选用Logit-4：（4参数对数）KcY=——————————+Y01+exp（-（a+blnX））Logit-5：（5参数对数）KcY=————————————+Y01+exp（-（a+blnX+Xc））

2、非线性校准方式的选用指数函数：（5参数指数）Y=Kcexp（alnX+b（lnX）2+c（lnX）3）+Y0Y：吸光度X：浓度Y0：基值（标准浓度为0的值）Kc：无限大浓度标准与Y0间的差（范围参数）a,b,c,d:测定非线性组分的因数样条函数:（三次方的样条函数）F(X)=aX3+bX2+cX+d用上述三次多项式采用内插法进行非线性校准方式的选用得到好的非线性校准曲线的必要条件根据实验的校准曲线正确选择校准方式合理选择校准物校准曲线的形状对实验结果准确性的要求校准物数目越多，得到的结果越准确。校准物的浓度间隔由

3、每种校准曲线来决定。校准物的浓度间隔影响反应准确度。校准物浓度应覆盖测定实验范围。双波长的使用双波长的使用双波长的作用：用于消除反应时的干扰因素。干扰因素：1分析溶液混浊2存在较大的干扰物质的光吸收3仪器及电源的噪音双波长的选择：1分析溶液混浊选择副波长时尽量接近主波长2消除干扰物质的光吸收干扰组分在两个波长处有相同的吸光度值3仪器及电源的噪音双波长的使用影响结果准确的因素病人标本试剂及校准品仪器人员结果异常零或负值？？？结果异常零或负值？？？可能的原因：结果异常零或负值硬件：样品针堵塞管路软件：正常范围/检测范围

4、主副波长因数（酶因数/斜率因数）定标次数反应方向输入错误结果异常零或负值其它：试剂位置是否正确该试剂是否曾冷藏结冰样品量不足结果异常重复性不好？？？结果异常重复性不好？？？可能的原因：结果异常重复性不好硬件：注加器泄露样品针堵塞灯泡亮度不稳清洗塔是否工作正常恒温水浴有异物检查反应杯重复性不好结果异常软件：测定时间是否合适定标因数是否过大其它：试剂是否正确试剂是否失效，有无异物交叉污染标准物是否正确交叉污染交叉污染常见原因：1仪器清洗机构管路堵塞2清洗剂使用不当3水质不良4样品针/试剂针不清洁5特殊样品6相邻试剂有干

5、扰交叉污染解决方法：1仪器清洗机构管路堵塞浓缩废液管是否堵塞干燥棒是否需要更换2清洗剂使用不当清洗剂是否使用规定品牌定期清洗是否严格执行交叉污染3水质不良进水过滤阀是否过脏纯水装置是否需要更新滤芯或交换树脂4样品针/试剂针/比色杯不清洁调整分析项目的顺序增加特殊清洗程序或启动OSS功能定期对样品针/试剂针/比色杯进行清洗交叉污染5特殊样品样品粘稠度过高6相邻试剂有干扰改变仪器添加试剂的顺序交叉污染质控结果与病人结果不符质控数据的方法是否与该试剂相符质控品是否被反复冻溶试剂的正常值范围是否发生变化如果有其它质控品可对

6、比测定调整斜率因数以室间质控结果为准常见问题结果小数点的设置定标次数的设定TBA-120FR水空白（试剂空白）设置注意大小写（Water）TBA-120FR清洗剂位置的设定TBA-120FRDatabase与Run画面盘号的对应血清指数血清指数血清指数血清指数血清指数血清指数血清指数血清指数[Exampleofsetting]TestnameTestID525354LipemiaHemolysisIcterusFlagandcriteriaNOR1.5NOR50NOR2.51.5+3.550+1002.5+5.53

7、.5++5.0100++1505.5++8.55.0+++6.0150+++2008.5+++12.56.04+2004+12.54+血清指数最大速率法最大速率法首先计算实验参数设定的读点时间内每个测光点间的吸光度变化，并确认吸光度变化最大值。其次对此时间两侧的比色点进行检查，确认此吸光度变化相对于最大吸光度变化落在实验参数设定的允许最大速率值（%）内。用此时间的数据进行最小二乘法计算每分钟吸光度变化。然而，如果最大吸光度变化小于缺省值0.33mAbs/min，将用所有数据进行最小二乘法计算每分钟吸光度变化，噪音将

8、最小。注意：加入试剂后无噪音的第一个测光点应作为测光点设定在读点时间内，至少应设定4个测光点，必须设定允许的最大速率值（%）。最大速率法最大速率法最大速率法参数设定中常见的问题参数设定中常见的问题超出定标范围的结果计算：如果样品结果超出定标范围，计算后在样品结果加有错误号码“？”。超出定标血清浓度的定标曲线由最后两个定标点进行延伸。用百分数设定此线的可靠范