实验十七-动物球虫病实验室诊断技术.doc

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1、实验十七动物球虫病实验室诊断技术一、实验目的及要求1.熟悉球虫卵囊的形态特征。2.掌握分离球虫卵囊的方法。3.了解常见球虫的种类。4.熟悉鸡球虫感染后的病变记分和粪便记分方法。二、实验器材1.仪器设备。上海XSP-2C生物显微镜（具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜）；目镜测微尺和物镜测微尺；盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、平皿；剪刀及手术刀；离心管；血细胞计数板。2.实验材料。感染球虫的患鸡,常见的球虫卵囊,蔗糖、食盐、硫酸镁、铬硫酸、重铬酸钾等。三、实验方法、步骤和操作要领（一）球虫的形态观察随宿主粪便排出的卵囊呈卵圆形、圆形或球形；无色、淡黄色或淡绿色，其形态大小随球

2、虫种类而异。外被有两层囊壁，外壁较厚，轮廓清晰；内壁较薄。内含颗粒状的胞质(即原生质团)。卵囊内具有一至多个孢子囊，每个孢子囊内含有一至多个子孢子，因种类而异。艾美耳属的球虫种类经发育后，原生质团分裂为四个孢子囊，每个孢子囊内含有两个子孢子。有些种类的球虫在卵囊的极端具有明显的卵膜孔，有些球虫的卵囊内膜突出于卵膜孔之外，形成极帽。畜禽常见球虫的种类：1．牛球虫。文献报道的有10种，其中9种为艾美耳属（Eimeria）球虫，另外一种为阿沙卡等孢球虫（Isosporaakscaica）。以邱氏艾美耳球虫(E.zurnii)致病力最强，牛艾美耳球虫(E.bovis)致病力较

3、强，它们寄生于牛消化道的上皮细胞。(1)邱氏艾美耳球虫(E.zurnii)。卵囊呈亚球形或球形，平均直径为18.6μｍ×14.6μｍ。淡黄色，无卵膜孔，胞质充满整个卵囊，无极体。卵囊孢子化时间为24～72小时。(2)牛艾美耳球虫(E.bovis)。卵囊呈卵圆形，褐色，有卵膜孔，平均大小27.7μｍ×20.3μｍ，卵囊孢子化时间为48～72小时。2.兔球虫。种类很多，有16种，属艾美耳属。仅介绍两种如下。(1)斯氏艾美耳球虫(E.stiedae)。寄生于肝、胆管上皮细胞内。致病力最强。卵囊甚大，长椭圆形，大小为26～40μｍ×16～25μｍ，略带淡红色，囊壁较厚，具

4、卵膜孔。(2)穿孔艾美耳球虫(E.perforans)。寄生于肠上皮细胞内。卵囊甚小，椭圆形，两端较钝，无色，大小为13.3～30.6μｍ×10.6～17.3μｍ，卵膜孔不明显。3.鸡球虫。报道的有9个种，属艾美耳属，世界公认的有7个种。(1)柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)。寄生于盲肠，多为宽卵圆形，少数为椭圆形，原生质呈淡褐色，卵囊壁为淡黄绿色（图17-1）。其卵囊平均大小为22μｍ×19μｍ，形状指数为1.16，裂殖体很大，直径可达54μｍ，第一代裂殖体包含的裂殖子可达900个，第二代为350个，最短孢子化时间为18ｈ，最短潜隐期为115ｈ。图17-1柔嫩

5、艾美耳球虫卵囊(2)毒害艾美耳球虫（E.necatrix）。其第一、二代裂殖生殖在鸡小肠，第三代裂殖生殖和配子生殖在盲肠。卵囊呈卵圆形，大小为13.2～22.7μｍ×11.3～18.3μｍ，囊壁无色、光滑。具极粒，孢子囊呈卵圆形，有斯氏体，无残体（见图17-2）。图17-2毒害艾美耳球虫卵囊(3)堆型艾美耳球虫（E.acervulina）。寄生于十二指肠。卵囊呈卵圆形，大小为17.7～20.2μｍ×13.7～16.3μｍ。光滑，卵囊壁淡黄绿色。孢子囊呈卵圆形，有斯氏体，具极粒，无残体（图17-3）。图17-3堆型艾美耳球虫卵囊(4)布氏艾美耳球虫（E.brunetti）

6、。寄生于小肠后段、直肠和盲肠近端区。卵囊平均大小为18.8μｍ×24.6μｍ，是鸡球虫中仅次于巨型艾美耳球虫的第二大型卵囊。形状指数为1.31。有一极粒，无残体和卵膜孔。裂殖体直径为30μｍ。孢子化时间为18ｈ，潜隐期为120ｈ。(5)巨型艾美耳球虫(E.maxima)。寄生于小肠中段。卵囊很大，是鸡球虫中最大型的卵囊，最大的卵囊达到42.5μｍ～29.8μｍ。卵囊呈卵圆形，一端钝圆，一端较窄，黄褐色，囊壁浅黄色。其形状指数为1.47。最大的裂殖体直径为9.4μｍ。（图17-4）。图17-4巨型艾美耳球虫卵囊(6)和缓艾美耳球虫(E.mitis)。寄生于鸡小肠前段。卵囊

7、较小，近球形，卵囊壁为淡黄绿色，有一极粒，无卵膜孔，也无残体。卵囊平均大小为15.6μｍ×14.2μｍ，最短孢子化时间为15h.（图17-5）。图17-5和缓艾美耳球虫卵囊(7)早熟艾美耳球虫（E.praecox）。寄生于小肠上段1／3处。卵囊呈卵圆形或椭圆形，平均大小为21.3μｍ×17.1μｍ，形状指数为1.24，囊壁光滑，呈淡黄绿色，原生质无色，无卵膜孔和残体，具极粒。孢子囊无残体。（图17-6）。图17-6早熟艾美耳球虫卵囊4.鸭球虫。鸭球虫常见于北京鸭群中，对北京鸭具有致病力的球虫有两种。（图17-7）。（1）毁灭泰泽球虫（Ty