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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2011,Vol.27,No.8还原型谷胱甘肽的稳定性研究朱义福(星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆526040)摘要:本文研究了pH、温度、光照以及外加抗氧化剂等因素对还原型谷胱甘肽(GSH)纯品溶液稳定性的影响。结果表明,GSH水溶液在pH=2.0~4.0范围内最为稳定;在30℃以下,24h内自身氧化较少;应避光处理或保存;外加抗氧化剂在pH=6.0时,保护作用明显。关键词:谷胱甘肽;稳定性;抗氧化剂文章篇号:1673-9078(2011)8-919-923Stabi
2、lityofReducedGlutathioneunderDifferentConditionsZHUYi-fu(StarLakeBioscienceCo.,Inc.,Zhaoqing526040,China)Abstract:TheeffectsofpH,temperature,sunlightandantioxidantonthestabilityofreducedglutathione(GSH)solutionwerestudiedinthispaper.ResultsindicatedthatGSHsolutionwasrelativ
3、estabileunderthefollowingconditions:pH2.0~4.0andtemperature<30℃.Anditshouldbekeptindarkplace.Besides,theGSHsolutionshowedthehigheststabilityinthepresenceofantioxidantatpH6.0.Keywords:glutathione;stability;antioxidant谷胱甘肽(Glutathione,GSH),即γ-L-谷氨酰-L-1材料与方法半胱氨酰-甘氨酸,是由L-谷氨酸、L-
4、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的生物活性三肽化合物。GSH是许多酶1.1材料与试剂反应的辅基,在生物体内具有清除体内自由基、解毒等GSH纯品(纯度>98%):日本Kyowa公司。四氧多种重要的生理功能,特别是对于维持生物体内适宜的嘧啶(Alloxan):美国sigma;二硫苏糖醇(DTT):上[1]氧化还原环境具有重要意义。国内外关于GSH的研究海生工所;抗坏血酸(Vc):广州化学试验厂;保险粉[2][3][4]主要集中在菌种选育、培养条件优化、分离纯化(Na2S2O4):上海国药集团化学试剂公司;其它试剂为[5]和临床应用上,其工业化生产技
5、术一直被国外极少数国产分析纯。发达国家所垄断,国内尚未实现工业化生产,从而造成1.2主要仪器GSH的市场价格居高不下,影响了GSH的推广和应用。SC-15数控超级恒温槽:宁波新芝生物科技公司;GSH易溶于水、稀醇、液氨和N,N-2甲基甲酰胺,CR21G高速冷冻离心机:日本Hitachi公司;752型紫外而微溶于或不溶于醇、醚和酮。GSH的固体较稳定,而可见光分光光度计:南京第四分析仪器公司;S40pH精水溶液在外界环境中受温度、pH、光照等条件影响,易密测量仪,AB54-S分析天平:瑞士METTLERTOLEDO氧化,产生氧化型谷胱甘肽(即G
6、SSG),GSSG是由两公司;RW20D搅拌器:德国IKA公司;AgilentLC1100分子GSH脱氢后通过二硫键相连的二聚体,其反应如液相色谱仪:美国HP公司。下:1.3分析方法[6]GSH含量测定采用四氧嘧啶Alloxan试剂法:(1)标准曲线的制作:准确称取6.146mg的GSH标准品,氧化型GSSG不具有生理活性,只有还原型GSH用40%乙醇溶解,定容至100mL,得到浓度为200才能发挥重要的生理功能。GSH的不稳定性是造成较难µmol/L的标准液。取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、分离纯化、产品纯度不高的重要原因。因
7、此,本文通过0.8mL、1.0mL上述标准液于试管中,补加去离子水至大量的试验对GSH稳定性进行研究,为国内GSH的工1.0mL,配成浓度为0µmol/L、40µmol/L、80µmol/L、业化生产提供参考。120µmol/L、160µmol/L、200µmol/L的GSH溶液。然收稿日期:2011-03-26后依次加入pH7.6的磷酸缓冲液2.5mL,0.1mol/L的作者简介:朱义福(1976-),男,工程师,研究方向:生物医药分离纯化技术甘氨酸溶液0.5mL,以及Alloxan试剂1.0mL,反应20919现代食品科技ModernFo
8、odScienceandTechnology2011,Vol.27,No.8min。以空白管校正零点,于305nm处测定吸光值A,含有一个活泼的巯基-SH,易被氧化
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