东洋纺 逆转录试剂盒.pdf

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1、12-03就PCR选东洋纺ReverTraAceqPCRRTKit(CodeNo.FSQ-101)中文说明书科研用TOYOBOCO.,LTD.LifeScienceDepartmentOSAKAJAPANTSB-029目录[1]前言...............................................1[2]产品内容...........................................2[3]其他必需品.........................................3[4]使用方法..............

2、............................4[5]相关操作步骤......................................5[6]常见问题..........................................8[7]相关产品..........................................9【注意】本试剂盒中所含的试剂均为科研用试剂。请勿作为诊断、临床试剂用。在使用时，请严格遵守实验室的一般注意事项，适当使用保护用品，安全操作。【保存】所有组分请均保存于-20℃条件下。[1]前言ReverTraAceqP

3、CRRTKit是基于制作RealtimePCR用模板cDNA的目的而开发的高效率且使用简单方便的逆转录反应试剂盒。本产品采用了本公司高性能逆转录酶ReverTraAce和作为RealtimePCR目的片段短链cDNA合成的最优化反应成分，能够高效率地合成适用于RealtimePCR的cDNA模板。此外，本产品简化了试剂盒的构成并且拥有快速的反应操作的特点，能够在短时间内简单方便地进行cDNA合成。※本产品的试剂盒内没有添附RealtimePCR试剂。关于RealtimePCR产品，推荐使用本公司的RealtimePCR用试剂RealtimePCRMasterMix系

4、列。（详情请参考[7]相关产品的内容）。◆本产品特征◆1．对应各种不同长度目标片段的高效率逆转录ReverTraAceqPCRRTKit采用了最适合于RealtimePCR用cDNA合成的反应缓冲液，和以最恰当比例混合的Primer混合液，对于各种不同长度的目标片段，不用摸索条件就能够进行高效率的逆转录反应。2．反应时间短、操作简单方便ReverTraAceqPCRRTKit只需要15分钟的逆转录反应，就能够对各种长度的目标片段进行高效率的逆转录反应。此外，在RealtimePCR的过程中，会自动清除抑制反应的残留RNA，无须另外进行RNaseH处理。3．提高了与R

5、ealtimePCR试剂的兼容性ReverTraAceqPCRRTKit采用了对于RealtimePCR反应体系的影响程度最小的成分，即使在PCR反应中添加了最多20%液量的逆转录反应液，也能表现出良好的反应曲线（已通过使用本公司的RealtimePCRMasterMix确认）。最适合用于表达量较少的mRNA的高灵敏度检测。1[2]产品内容◆本产品包含以下几种试剂，每10μl反应体系可使用200次。所有试剂请均保存在-20℃条件下。试剂名保存条件容量5×RTBuffer-20℃400μl（ReactionBuffer+MgCl2+dNTPs）EnzymeMix（Re

6、verTraAcereversetranscriptase-20℃100μl+RNaseInhibitor）PrimerMix-20℃100μl（RandomPrimer+Oligo(dT)Primer）Nuclease-freeWater-20℃1000μl×25×RTBuffer含有反应缓冲液、MgCl2、dNTPs等5倍浓度的逆转录反应液Buffer。溶解时，可能会出现白色沉淀，但不影响其品质。请使用振荡器等仪器使其混合均匀，等完全溶解之后再使用。EnzymeMix含有本公司高性能逆转录酶ReverTraAce和RNaseInhibitor的混合酶液。-20℃

7、条件下不会冻结。PrimerMix含有RandomPrimer和Oligo(dT)Primer的混合引物，以最恰当的比例混合，对于各种不同长度的目标片段都能进行高效率的逆转录反应。Nuclease-freeWaterNuclease-free级别的灭菌蒸馏水。为避免影响聚合酶的活性，未经过DEPC处理。2[3]其他必需品◆除本产品之外，请再准备以下几种试剂和仪器。•Thermalcycler和Incubator本产品的建议使用温度为37℃、98℃、以及65℃，请准备好符合条件的相关仪器。•Nuclease-freeWater本产品已添附可使用200次的Nucle