酶制剂类饲料添加剂-葡萄糖氧化酶-论文.pdf

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1、全国饲料添加剂信息站:酶制剂类饲料添加剂一葡萄糖氧化酶一l5一墨墨全国饲料添加剂信息站酶制剂类饲料添加剂一葡萄糖氧化酶【别名】葡糖氧化酶工艺,1998年正式投入生产,1999年农业部将其【化学名】8一D一葡萄糖氧化还原酶定为12种允许使用的饲料酶制剂添加剂之一。【商品名】葡萄糖氧化酶1.传统发酵法【英文名】Glucoseoxidase发酵法生产柠檬酸和葡萄糖酸的废菌丝富【分子量】来源不同,分子量不同。目前工含葡萄糖氧化酶,是工业生产葡萄糖氧化酶的理业酶制剂主要来源于黑曲霉,分子量在16万左想资源。对工业废菌丝的处理还可以减轻由其右;点青霉葡萄糖氧化酶,分子量152000;尼崎造成

2、的环境污染。由于黑曲霉或青霉在产生葡青霉葡萄糖氧化酶,分子量154000;黑曲霉葡萄萄糖氧化酶的同时还常伴有过氧化氢酶(主糖氧化酶,分子量18600。要)、一淀粉酶、蔗糖酶和其他蛋白质的产生,【CAS号】9001—37—0因此有必要首先对葡萄糖氧化酶进行提纯,以除【EINECS号】232—601—0去杂蛋白。常用纯化方法如下。【性状】葡萄糖氧化酶固体剂型为黄棕色(1)沉淀法粉末,色泽一致,无结块,气味微酸、无其它异味,选择适宜沉淀剂浓度通过分级沉淀或一步几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚;液体剂型为淡黄沉淀可将葡萄糖氧化酶和其他蛋白质初步分开。至浅棕色半透明液体,气味微酸、无其它异味。沉

3、淀操作需在低温下进行,因为葡萄糖氧化酶在【制法】葡萄糖氧化酶主要存在于微生物室温下对某些沉淀剂不稳定,易失活。体内,动植物体内含量不丰富,提取也有一定的(2)吸附法局限性,从酶量来说也不丰富,而霉菌在一定条吸附材料的吸附机理是在一定条件下,吸附件下,产生葡萄糖氧化酶的能力强,且培养简单。材料的活性基团与葡萄糖氧化酶通过疏水相互便于大规模生产葡萄糖氧化酶的主要霉菌来源作用而被吸附,然后通过改变缓冲液的浓度和于黑曲霉(Aspergillusniger)和青霉菌(Penicilli—pH值而改变吸附材料中活性基团的电离状态使um)。酶的生产方法可分为提取法、发酵法以及葡萄糖氧化酶与吸附

4、剂解吸。化学合成法。(3)离子交换法美国用黑曲霉变种,日本多用青霉菌(Peni—葡萄糖氧化酶的等电点在4.9左右,而过氧cilliumamagaskinense),苏联则用青霉菌(Peni-化氢酶的等电点在6.5附近。因此在提纯葡萄ciliumvitale),亦可用金黄色青霉菌(P.chrysoge.糖氧化酶时应选用阴离子交换剂,且在pH值大Bum)、点青霉(P.notatum),在受控制条件下进于4.9时上样和淋洗,此时葡萄糖氧化酶带负电行深层发酵,用乙醇、丙酮使之沉淀经高岭土或荷,可被阴离子交换剂吸附留柱,而过氧化氢酶氢氧化铝吸附后再用硫酸铵盐析、精制而得。我带正电荷随淋洗液

5、流下,从而使二者得以分离,国自1986年开始研究葡萄糖氧化酶的制备提纯最后用pH值小于4.2的缓冲液洗柱,使葡萄糖一l6一中国饲料添加剂2014年第9期上(总第148期)氧化酶带正电荷而从柱上被洗脱。【功用】葡萄糖氧化酶广泛用于食品工2.菌种基因改良发酵法业、检测分析、医药行业及饲料工业等领域。因黑曲霉和青霉菌发酵生产过程中产生纤在食品工业中,葡萄糖氧化酶具有脱糖(防止蛋类产品褐变)、除氧保鲜(常用于果蔬、肉维素酶、淀粉酶、过氧化氢酶等其他多种副产物,类、啤酒等除氧,减少土豆非酶褐变,牛奶、果汁、大量的杂蛋白对后期的分离纯化工作造成了很速冻食品保鲜,防止虾肉变色,防止马1:3铁罐

6、壁大的困难,也增加了成本,所以有研究使用基因氧化腐蚀)、杀菌等作用,得到广泛的应用。工程菌重组表达葡萄糖氧化酶,将来源于黑曲霉在检测分析中,可制成血糖测定试纸或测糖中的葡萄糖氧化酶基因整合到毕赤酵母中,成功仪,用于血液、尿液及发酵液中葡萄糖的测定。表达后,经发酵生产,提纯精制成精酶制剂。在医药行业中,葡萄糖氧化酶与过氧化氢【工艺流程】从黑曲霉中生产制备葡萄糖氧酶、淀粉葡萄糖苷酶、葡聚糖酶等制成的酶制剂化酶的工艺流程见图1。可除去或缓解牙斑、牙垢以及防止龋齿的形成。含有葡萄糖氧化酶等成分的制剂,还可添加在化I黑曲霉细胞的培养I__.叫过滤,留滤液卜——妆品中,具有抗头皮屑的作用。也

7、可用于对过氧酸化至pH为4.0"--4。5}._..{离子交换柱分离化氢敏感的淋巴瘤的导向目标的治疗。在饲料工业中,葡萄糖氧化酶是一种新型的I堡婆婆丝H尘.H竺壅卜酶制剂,可延长饲料保存时间,改善胃肠道pH区—显蛔值,维持肠道微生态平衡,改善动物肠道健康,解除霉菌毒素和药物中毒,减少抗生素使用。图I从黑曲霉中生产制备【性价比】目前葡萄糖氧化酶作为安全的生葡萄糖氧化酶的工艺流程物抗氧化剂,用途非常广泛,随着对氧化机理和【质量标准】葡萄糖氧化酶的质量标准参考酶固定化研究的不断深入,葡

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