心肝同治法及其组方对大鼠缺血心肌梗死面积及新生血管因子表达的影响-论文.pdf

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1、黑龙江中医药·方药研究·心肝同治法及其组方对大鼠缺血心肌梗死面积及新生血管因子表达的影响林华蔡智刚唐新征(深圳市福田区中医院·518034)摘要目的探讨心肝同治法及其组方对大鼠缺血心肌梗死面积及缺氧诱导因子1(HIF一10【)、血管生成素一1／血管生成素一2(Ang-1／Ang一2)表达的影响。方法：60只wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、美托洛尔组和心肝同治组。除假手术组大鼠外，结扎各组大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型，并于造模后予相应药物治疗12d。治疗结束后，检测大鼠心肌梗死面积的范围及缺氧诱导因子10【、Ang一1／Ang一2的表达结果：心肝同治组心肌梗死面积

2、小于对照组，·心肌细胞HIF-1的表达高于对照组，心肝同治组心肌细胞Ang一1的表达高于对照组，Ang一2的表达低于对照组，差异均有统计学意义(P<0．05)。结论：心肝同治法及其组方能够减少心肌梗死面积，促进HIF一1的表达，促进Ang-1、抑制Ang-2的表达，从而达到增加心脏侧枝循环，抗心肌缺血的作用。关键词心肝同治心肌梗死面积缺氧诱导因子1d血管生成素一1血管生成素一2冠状动脉粥样硬化性心脏病在中医学领域中属“胸痹心造模后每日灌胃倍他乐克10mg／(kg·d)。各治疗组均于造模后痛”范围，作者认为心肝同治法能明显改善心脏缺血，是与24h进行相应药物干预1次／d，灌胃持续1

3、2d。促血管新生因子密切不可分，故促进血管生成为中医药防治2．3样本的取得、分离与制备冠心病的可能机制之一。故拟定心肝同治组方，用于治疗缺每组大鼠灌胃12d后取9只大鼠麻醉后剪开胸腹腔，分血性心脏病，可以显著改善患者的心痛症状。本研究旨在探离心脏，在心肌坏死组织周边区剪取心肌约100mg，速放冻存讨心肝同治组方对急性心肌缺血大鼠心肌梗死面积、缺氧诱管内，置液氮中保存备用。导因子la(HIP一1a)以及血管生成素一1(Ang—1)、血管2．4观察指标及方法生成素一2(Ang一2)表达的影响，为该方的临床应用提供理论2．4．1心肌梗死范围测定参考文献[1]，将大鼠梗死心肌依据。组织与

4、未梗死心肌组织分别称重，以梗死心肌占左心室肌重1材料量的百分比表示梗死范围。1．1动物2．4．2实时PCR法检测心肌HIF一1amRNA表达样品总RNA选用雌性Wistar大鼠6O只，体质量220～260g，由广的提取及纯化按试剂盒说明进行。东省实验动物中心提供。2．4．3免疫组织化学测定Ang一1／Ang一2蛋白表达严格按照1．2药品试剂盒要求进行。心肝同治法的基本处方组成：白参10g，柴胡10g，姜黄3结果15g，熊胆0．1g，九香虫5g，白芥子3g，白芍15g：制剂：3．1心肌梗死范围人参、熊胆、九香虫粉碎成细粉，混匀；姜黄、柴胡、白芥子、表1显示，假手术组大鼠无心肌梗死。

5、各治疗组梗死范白芍等五味加水煎煮2次，每次1．5小时，合并煎液，滤过，围均明显小于模型组(P<0．05)，心肝同治高低剂量组明显滤液浓缩至相对密度为1．23—1．43的稠膏，真空干燥，粉碎优于消心痛组(P<0．05)，差异有统计学意义。成细粉，加入上述细粉，混匀，备用。表1心肝胃同治方对梗死范围的影响1．3仪器及试剂HIF—lfl定量试剂盒、Ang一1／Ang2定量试剂盒，荧光定量PCR检测系统；紫外分光光度计：sT一2转膜仪和MV一3电泳仪；图像分析系统。2方法2．1急性心肌梗塞(AMI)模型的建立及分组方法根据文献操作，具体参见文献J。注：与模型组比较：P<0．05；与倍他乐

6、克组比较：#P2．2实验分组及给药

7、组(P<0．05)。高剂量中药组HIF—lamRNA(kg·d)，相当于成人临床用药等效剂量：倍他乐克组12只，表达与倍他乐克组相当，差异无统计学意义(P=0．062)。2014年第4期表2大鼠缺血心肌HIF-IamRNA的表达不通的本虚标实之证，其病位在心络，累及心肌。酿生心气亏虚、痰瘀互结之因，除与饮食失当、寒邪内侵、年老体虚等密切相关外，精神情志因素在本病的发生、发展过程中起着重要作用，所谓“七情之由作心痛”(沈金鳌《杂病源流犀烛·胃病源流》)，七情中尤以肝失疏泄，条达失司