心肝同治法及其组方对缺血心肌血管新生相关因子影响的研究-论文.pdf

《心肝同治法及其组方对缺血心肌血管新生相关因子影响的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·6O·临床合理用药2014年7月第7卷第7期中ChinJofClinicalRationalDrugUse，July2014，VD1．7No．7B·疗效分析与评价·心肝同治法及其组方对缺血心肌血管新生相关因子影响的研究林华，蔡智刚，唐新征【摘要1目的探讨心肝同治法及其组方对大鼠缺血心肌血管新生相关因子的影响。方法60只Wistax大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、美托洛尔组和高、低剂量组方组。除正常对照组、假手术组大鼠外，结扎各组大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型，并于造模后予相应药物治疗12d。治疗结束后，检测缺血心肌微血管密度(MVD)，

2、实时聚合酶链式反应法检测缺血心肌血管内皮生长因子受体2(VEGFR一2)表达。结果模型组缺血心肌MVD较正常对照组及假手术组显著增加，差异有统计学意义(P<0．05)；高、低剂量组方组及倍他乐克组MVD较模型组显著增加，差异均有统计学意义(P<0．01)；高、低剂量组方组之间比较，差异有统计学意义(P<0．01)。模模型组VEGFR．2mRNA表达上调，与正常对照组及假手术组比较，差异有统计学意义(P<0．05)；高、低剂量组方组及倍他乐克组VEGFR-2mRNA表达均显著高于模型组，差异有统计学意义(P<0．05)；高、低剂量组方组之间比较，差异有统计

3、学意义(P<0．05)。结论心肝同治法及其组方能够促进缺血心肌MVD、VEGFR~表达，从而改善心肌缺血，促进侧支循环的形成。【关键词】心肌缺血；心肝同治；血管内皮生长因子受体2；心肌微血管密度；大鼠【中图分类号】R542．2【文献标识码】A【文章编号】1674—3296(2014)07B一0060—02冠心病在中医学中属“胸痹”、“心痛”范畴，笔者认为心肝脉左前降支，回纳心脏，逐层关胸，关闭胸腔前恢复胸腔负压，同治法能显著改善心肌缺血，与促血管新生因子密切相关，促待大鼠出现自主呼吸后，拔除气管插管。术毕肌内注射青霉血管生成为中药防治冠心病的可能机制之一

4、。故拟定经验方素，连用3d。以心电图sT段明显抬高持续>30min、结扎线以心肝同治组方，临床上用于治疗缺血性心脏病，可以显著改善下心肌颜色变苍白、搏动减弱为造模成功标志。正常对照组不患者临床症状。本实验旨在探讨心肝同治组方对急性心肌缺进行手术，假手术组只开胸不结扎，冠脉左前降支。血大鼠缺血心肌微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子受体21．2．2实验分组及给药：实验分6组，其中假手术组和正常对(VEGFR~)表达的影响，为该方的I临床应用提供实验依据。照组各11只，不进行药物干预，常规饲养。将48只造模成功1材料与方法大鼠采用随机数字表法分为：模型组l

5、2只，造模后灌胃0．9％1．1材料氯化钠溶液lOml·kg～·d。。；高剂量中药组12只，造模后灌1．1．1动物：选用清洁级雌性Wistar大鼠60只，体质量220～胃中药0．99g·kg～·d～，相当于成人临床用药等效剂量的2260g，由广东省实验动物中心提供。倍；中药低剂量组12只，造模后灌胃中药0．495g·kg～·d～，1．1．2药品：心肝同治法的基本处方组成：白参lOg，柴胡相当于成人临床用药等效剂量；倍他乐克组12只，造模后每日10g，姜黄15g，熊胆0．1g，九香虫5g，白芥子3g，白芍15g。制灌胃倍他乐克10mg·kg～·d～。各治疗组

6、均于造模后24h剂：人参、熊胆、九香虫粉碎成细粉，混匀；姜黄、柴胡、白芥子、进行相应药物干预1次／d，灌胃持续12d。白芍等5味加水煎煮2次，每次2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩1．3样本的取得、分离与制备以上各组大鼠于灌胃12d后至相对密度为1．30—1．35的稠膏，真空干燥，粉碎成细粉，加随机取9只大鼠腹腔注射麻醉，剪开胸腹腔，迅速摘取心脏，入上述细粉，混匀，备用。制剂工艺由湖南中医学院附院中药在心肌坏死组织周边区剪取心肌约lOOmg，0．9％氯化钠溶液制剂室完成。临用前用0．9％氯化钠溶液配成等体积混悬液洗净，滤纸吸干，速放冻存管内，置液氮中保存备用

7、。灌胃使用。1．4观察指标及方法1．1．3仪器及试剂：人VEGF、Ang-1／Ang-2定量试剂盒(武汉1．4．1缺血心肌区MVD计数：应用免疫组织化学法对各组大博士德生物工程有限责任公司，)Line-Gene荧光定量PCR检鼠心肌组织中Ⅷ因子相关抗原进行检测。光学显微镜下观察，测系统，杭州博日科技有限公司生产；UV-2000紫外分光光度Ⅷ因子阳性表达呈棕黄色至棕褐色，凡是染成棕黄色的单个内计，尤尼柯(上海)仪器有限公司生产；sT-2转膜仪和MV-3电皮细胞或内皮细胞簇均作为一个血管计数，凡管腔大于8个红泳仪，大连竞迈生物科技有限公司(J—MAX)生产；

8、ImagePro细胞大小、带有较厚肌层的血管区域的血管均不计数。操作按Plus4