SELDI-TOF-MS技术在肝脏疾病腹腔积液差异蛋白研究中的应用-论文.pdf

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1、现代医药卫生2014年4月15日第3O卷第7期JModMedHealth，April15，2014，Vo1．30，No．7·1O43·因及处理fJ1．医学检验与临床，2008，19(3)：131．医疗装备，2011，24(10)：35—36．[7]马春芳，王剑超，陈雪静．利用血液分析仪警示信息筛查EDTA【10】周翼，吴林军．假性血小板减少原因的探讨[J】．当代医学，依赖性假性血小板减少症叨．临床检验杂志，2010，28(3)：181．2012，18(15)：41．[8]李永红，钟步云．血细胞分析仪测血小板结果偏低的原因及【11】弓文秀，张文菊．假性血小板减少原因分析【J]．临床合理用药纠正方

2、法fJ1．临床检验杂志，2001，19(2)：112．杂志，2012，5(10)：26．[9]边红放．全自动血细胞分析仪引起血小板减少原因分析[J】．(收稿日期：2013—11-11)SELDI．TOF．MS技术在肝脏疾病腹腔积液差异蛋白研究中的应用王萍，张英剑2，吕姝炎，潘新娟，张瑜，郭虹(1．河南科技大学医学院公共卫生学教研室，河南洛阳471003；2．河南科技大学第一附属医院消化内科，河南洛阳471003)【摘要】目的探讨表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术在肝脏疾病腹腔积液差异蛋白研究中的应用价值。方法应用SELDITOF—MS技术对肝硬化及原发性肝癌患者腹

3、腔积液蛋白质进行测定，应用质谱仪分析蛋白质波谱。结果原发性肝癌与肝硬化患者腹腔积液相比，质荷比为7852、11467的蛋白质波峰强度明显增强．差异有统计学意义(P<0．05)，该蛋白质组对于肝癌患者腹腔积液的灵敏度为83．56％，特异性为89．82％。结论质荷比为7852、11467的蛋白质谱对于肝癌腹腔积液患者具有特征性。【关键词】蛋白质类；腹水；肝硬化；肝肿瘤；质谱分析法doi：10．3969~．issn．1009．5519．2014．07．036文献标识码：B文章编号：1009。5519(2014)071043—02肝癌绝大部分发生在慢性病毒性肝炎、肝硬化的基础上。通1资料与方法过检测早

4、期发生变化的蛋白，可能发现有助于早期诊断肝癌的生1．1标本来源标本来源于2010年5月至2012年12月河南物学标记物[1]。近年来，有学者运用蛋白质组学技术在肝癌患者血科技大学第一附属医院消化内科住院患者．其中肝癌腹腔积液患清、组织及肝癌细胞进行了积极探索，发现了多种有价值的生物者32例(肝癌组)，平均年龄(51．5+10．6)岁，均明确诊断，并在腹学标记物12]。检测外周血中蛋白质谱的改变能反映肿瘤组织中蛋腔积液中查到癌细胞；肝硬化腹腔积液患者49例(肝硬化组)，平白质谱的改变，是寻找肝癌特异性生物学标记物的主要策略之一。均年龄(48_3±11．2)岁，与肝癌组患者年龄具有一致性。肝硬化的

5、血清容易获取并易于随时监测，通过检测早期发生变化的蛋白．诊断依据2005年中华医学会传染病与寄生虫病学分会和肝病学可能发现有助于早期诊断肝癌的生物学标记物。临床血清蛋白质分会联合修订的标准旧。组学研究主要依赖三大技术[31：血清样品制备技术，高通量、高灵1．2方法敏度的蛋白分离与鉴定技术，生物信息学及统计学分析技术。目1．2．1标本采集两组患者均采集200mL样本腹腔积液冰袋包前，在该方面的研究已从小范围、小规模、低通量逐步向宽领域、裹，于一70℃保存，反复离心(1500r／min)、超滤(膜包超滤)、浓大规模、高通量扩展。血清、尿液等体液中含有大量疾病标志物，缩，去除杂质和清蛋白，并应用双缩

6、脲法(Bradford法)进行蛋白血液中可能含有大量未发现的可用作疾病标志物的多肽，这可能质水平检测。是因为疾病早期就可在蛋白质水平出现细微但重要的改变。肝癌1．2．2蛋白质测定应用质谱仪测定蛋白质，采用健康者上清液是较为常见的恶性肿瘤，缺乏可靠的早期诊断指标是其预后较差作为内参照，原始数据先以蛋白质芯片Proteinchip3．0软件校正．的主要原因，大部分肝癌患者发现时已经失去手术机会。因此，寻再利用Proteinchip3．0自带的BiomarkerWizaxd3．1软件对血清蛋找灵敏、特异的生物学标志物以便于肝癌的早期诊断，一直是肝白质指纹图谱数据进行比较分析f7]。应用生物标志物学模

7、型软件病研究的焦点和热点问题。(BiomarkerPatternsSoftware)进行分析筛选。肝硬化和肝癌引起的腹腔积液临床上很常见．并且二者的鉴1．3统计学处理应用SPSS17．0统计软件进行数据分析．计量别有时非常困难，寻找有价值的肝癌腹腔积液特异性标志物非常资料以+』表示，采用t检验。P