自身抗体检测及应用课件

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1、自身抗体的检测及应用一、概述自身免疫耐受。自身免疫（autoimmunity）自身抗体（autoantibody）或自身致敏淋巴细胞自身免疫性疾病二、自身抗体的检测（一）抗核抗体（antinuclearantibody，ANA）泛指抗各种细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。1、ANA的类型（1）抗核蛋白抗体（2）抗DNA抗体抗双链DNA抗体（抗dsDNA）抗单链DNA抗体（抗ssDNA）。（3）抗ENA抗体可提取性核抗原（extractablenuclearantigens，ENA）2、ANA的检测

2、方法间接免疫荧光法用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质，还可用核质丰富的培养细胞如Hep-2，作为抗原。用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免疫荧光图形。稀释待检血清可检测ANA效价。3.常见的ANA图形及临床意义均质型（homogeneous，H）斑点型（speckled，S）核膜型（membranous，M）核仁型（nucheolar，N）4.抗dsDNA的检测常用间接免疫荧光法检测，常用的抗原基质是马疫锥虫或绿蝇短膜虫。（二）抗ENA抗体谱不同的自身免疫病可产生不同的抗ENA抗体。通过检测抗ENA抗体的类型及其组

3、合，可综合诊断自身免疫病的类型。1、检测方法双向免疫扩散对流免疫电泳斑点酶免疫技术免疫印迹技术免疫印迹技术（最常用）先将ENA混合抗原作凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把这些区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用酶标抗体使相应的抗原带显色2、抗ENA抗体的主要类型及临床意义（1）抗Sm抗体抗Sm是SLE的特异性标志之一（2）抗核RNP抗体（抗nRNP抗体）又称抗U1RNP抗体。抗U1RNP抗体是诊断混合性结缔组织病（MCTD）的重要血清学依据，是MCTD的诊断标准之一。（3）抗SSA/Ro和抗SSB/La这两

4、种抗体是干燥综合症（SS）患者最常见的两种自身抗体（4）抗J0-1抗体最常见于多发性肌炎（PM）患者。（5）抗Scl-70抗体几乎仅出现在PSS（进行性系统性硬皮病）患者体内，是PSS的特征抗体（三）类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）RF是以变性IgG为靶抗原的抗体，它能与人或动物的变性IgG结合，而不与正常IgG结合，RF主要出现在类风湿关节炎患者。RF的检测最常用IgG致敏的胶乳颗粒凝集试验，或速度散射比浊法，但只能检测IgM类的RF。IgG类，IgA类和IgE类RF需ELISA等方法检测。

5、（四）其他自身抗体1.抗中性粒细胞胞质抗体（anineutrophilcytoplasmicantibodies，ANCA）以人中性粒细胞胞质为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病有关。分胞质型（cANCA）和核周型（pANCA）。可用ELISA或间接免疫荧光法测定。2.抗心磷脂抗体（anti-phospholipidantibody，APLA）靶抗原是血浆中的磷脂结合蛋白。APLA包括一组自身抗体，如抗心磷脂抗体（ACLA），抗磷脂酸抗体（APAA）和抗磷脂酰丝氨酸抗体等。3.抗平滑肌抗体（anti-smoothmu

6、scleantibody，ASMA）是自身免疫性肝炎的血清学标志性抗体。常用间接免疫荧光分析检测。4.抗角蛋白抗体（anti-keratinantibody，AKA）主要见于类风湿性关节炎患者，对于早期诊断RA有重要意义。可用间接免疫荧光法检测。但敏感性较低。与RF不平行。5.抗乙酰胆碱受体抗体是重症肌无力的标志性自身抗体，对重症肌无力的诊断有特异性。可用ELISA检测。6.抗骨骼肌抗体与成年型重症肌无力有关。7.抗胰岛细胞抗体与I型糖尿病有关。三、临床应用1、检测项目的选择2、检测方法的选择3、自身抗体检测的质量

7、控制