血红素氧合酶-1及Toll样受体2-4在直肠癌组织中表达及意义.doc

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1、血红素氧合酶-1及Toll样受体2/4在直肠癌组织中表达及意义【摘要】目的：探讨血红素氧合酶_1(hemeoxyenase-l,HOT)和Toll样受体2/4(Toll-likereceptor2/4,TLR2/4)在直肠癌中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学法和RT-PCR检测30例直肠癌组织中H0-1蛋白以及H0-1mRNA、TLR2/4mRNA的表达。结果：直肠癌组织中H0-1蛋白表达(13/30)明显高于正常组织(3/30)(P<；0.05),HO-1mRNA表达也明显高于正常组织(t二15.24,P<；0.05)；直肠癌组织中T

2、LR2/4mRNA的表达髙于正常组织(P<；O.05),且HO-1mRNA与TLR2/4mRNA表达之间存在相关性(P<；0.05)o结论：H0-1和TLR2/4在直肠癌组织中高表达且呈正相关，提示参与直肠癌的发生、发展。【关键词】直肠肿瘤血红素氧合酶TToll样受体【ABSTRACT]Objective：Toinvestigatetheexpressionandsignificaneeofhemeoxygenase-1(HOT)andToll-likereceptor2/4(TLR2/4)inrectaicarcinoma・Methods

3、：TheexpressionofHOTproteinandH0~lmRNA、TLR2/4mRNAin30casesofrectalcarcinomawasmeasuredusingimmunohistochemicalmethodandreversetranscriptase-polymerasechainreaction(RT-PCR)・ResuIts：TheexpressionofH0~lproteininrectalcarcinoma(13/30)wassignificantlyhigherthanthoseinnormaltissue(3/

4、30)(P<；0.05).TheexpressionofHO-1mRNAwasalsosignificantlyhigherthanthoseinnormaltissue(t=15・24,P&It；0.05)；TheexpressionofTLR2/4mRNAinrectaicarcinomawashigherthanthoseinnormaltissue(P<；0.05),andHOTmRNAexpressionwasassociatedwithTLR2/4expression(P<；0・05)・Conclusion：Theexpre

5、ssionofH0~landTLR2/4washigherinrectalcarcinomaandhadassociationwitheachother.【KEYWORDS]Rectalcarcinoma•Hemeoxygenase-1•Toll-likereceptors血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1,HOT)又称热休克蛋白32(hotshockprotein32,HSP32),是将血液循环中衰老的红细胞及血红蛋白释放出的血红素降解为铁离子、胆绿素与C0的起始酶和关键酶。Toll样受体(Toll-likereceptors,TL

6、Rs)与Toll蛋白同源，是目前发现并且研究较多的天然免疫因子，在参与促炎反应、促进免疫细胞成熟分化及调节免疫应答等方面发挥重要作用,TLR2/4是研究较多、功能认识较为全面的2种。最近的研究表明HO-1和TLR2/4可能参与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移过程，并可作为相关免疫佐剂治疗肿瘤。本研究用免疫组织化学和RT-PCR技术，对直肠癌组织及正常组织中H0-1和TLR2/4表达水平进行测定，探讨H0-1和TLR2/4在直肠癌发生、发展中的作用，为进一步了解直肠癌的发病机制及探索其治疗新途径提供理论基础。1资料与方法1.1一般资料连续收集山东大学附

7、属省立医院胃肠外科2006年12月一2007年4月直肠癌根治术中切除的直肠癌标本30例，其中男18例，女12例。年龄51〜82岁，平均年龄64岁。高位直肠癌13例，中低位17例。术后病理组织学检查确诊为直肠癌，直肠癌组织距肿瘤边缘<；3cm,切下后30min内采集，立即存于液氮中，以距肿瘤中心10cm的正常直肠黏膜组织为对照。1.2方法1.2.1免疫组织化学法检测HO-1蛋白的表达鼠抗人HO-1单克隆抗体、即用型SABC免疫组织化学染色试剂盒及DAB显色试剂盒均购自武汉博士德公司。实验方法严格按照试剂盒操作说明进行。HO-1阳性细胞计数：HO-

8、1阳性细胞表达为棕黄色颗粒，高倍镜下主要存在于细胞质中，细胞膜上也有少量表达。光镜下随机选取10个连续不重复的高倍(X40