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《照射时间延长对小鼠Lewis肺癌凋亡影响初步观察.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、照射时间延长对小MLewis肺癌凋亡影响初步观察【摘要】目的模拟IMRT照射模式,观察照射时间延长对小鼠Lewis肺癌凋亡的影响及Caspase-3表达的变化。方法将荷Lewis肺癌C57BL/6雄性小鼠40只随机分为假照组、常规照射组（A组）、IMRT模拟组（B1组和B2组）4组,照射后取出肿瘤，测细胞凋亡率，及Caspase-3表达。结果各组凋亡率的差别有统计学意义（F=41.83,P1.2主要试剂和仪器PI染液和兔抗鼠Caspase-3单克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司（美国SantaCruzBiotech
2、no-logy公司提供）。Triton-x-100购自北京中衫金桥生物技术有限公司。Varian23EX408高能直线加速器由青岛大学医学院附属医院肿瘤中心提供。美国BD公司岀品FACSort流式细胞仪。荧光显微镜（BH-2型）为日本OLYMPUS产品。1.3实验方法1.3.1荷瘤小鼠模型的制备将种鼠断颈处死后，在无菌条件下分离出生长良好的肿瘤组织，用0.9%生理盐水洗净血性物后，用天平称重。剪碎后按肿瘤组织加入0.9%生理盐水3mL的比例，经砚磨成均浆后经200目筛网过滤,0.4%台盼蓝染色，活细胞拒染，死细胞则被
3、染成蓝色,显微镜下计活细胞数，用生理盐水稀释为2.8x106mL・1,制成瘤细胞悬液，将0・2mL的瘤细胞悬液接种到健康小鼠右腹股沟皮下。接种后1周，肿瘤体积为（0.65±0.01）cm3,随机分组进行实验［4］。1.3.2实验分组荷lewis肺癌的C57BL/6雄性小鼠40只随机分为假照组、常规照射组（A组）和2个IMRT模拟组（B1和B2组）4组,40只/组。1.3.3照射方法将小鼠（包括假照组小鼠）用10%水合氯醛（350mg/kg）经腹腔麻醉后，用胶布固定在固定板上，记号笔标出小鼠肿瘤体表定位，在瘤体上放1c
4、m厚凡士林纱布补偿，用美国Varian23EX408高能直线加速器产生的6MV-X线垂直照射靶区，源皮距为100cm,剂量率为6Gy/min,照射野均为2.0cm畑0cm,总照射剂量15Gy/h鼠均在清醒状态下照射。（1）A组分3次照射，照射间隔时间1.7分钟,总时间6min;（2）B1组:分5次照射，照射间隔时间7.0分钟,总时间30分钟;⑶B2组:分5次照射，照射间隔时间10.5分钟,总时间45分钟;各组总照射剂量相同。照射后的小鼠脱颈处死。1.3.4细胞凋亡及Caspase-3的检测剥离肿瘤组织，去除坏死组织,
5、剪碎后70%乙醇固定,洗涤后再过滤，加入RNA酶水浴PI染色，上机检测细胞凋亡率;加入0.1%Triton-x-100,洗涤后，加入Caspase-3单抗，上机检测。1.4统计学方法所有数据均用士s表示。采用SPSS13.0forwindows统计软件包，进行单因素方差分析，P参考文献[1]殷尉伯，田凤华.2001年全国放射治疗人员及设备调查报告[J]冲华放射肿瘤学杂^,2002,11(3):145-147.[2]陈杰，程惠华.立体适形调强放射治疗进展[J].福州总医院学报,2006,13(3):125-129.[3
6、]刘阳•三维适形放射治疗中的物理学与生物学[J].实用肿瘤学,2006,20(4):350-352[4]WangJ乙LiXA,DSouzaWD,etal.ImpactofprolongedfractiondeliverytimesontumorcontrolAnoteofcautionforintensity-modulatedradiation-therapy(IMRT)[J].lntJRadiatOncolBiokPhys,2003,57(2):543-552[1]王鑫，等•精确放疗所面对的生物学问题[J]•中华
7、肿瘤防治杂志2006年5月第13卷第10期:101-104.[2]FlorianSerzing.Radiobiologicalinvestigationofdose-rateeffectsinintensity-modulatderadiationtherapy[J].StrahlentherapyundOnkologie,2005,(1)：42~48.[3]MuX,LofrothPO,KarlssonM,etal.Theeffectoffractiontimeinintensitymodulatedradiothe
8、rapy:theoreticalandexperimentalevaluationofanoptimization,problem[J].RadiotherOncol,2003;68:181~187[4]FowlerJF.Lossofbiologicaleffectinprolongedfractiondelivery[J].lntJRadia
