人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及其生物学特性观察.doc

《人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及其生物学特性观察.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及其生物学特性观察【摘要】目的建立一种能很好模拟人体内生物学行为的胃癌裸小鼠原位移植和转移模型。方法采用人胃癌SGC-7901细胞株在裸鼠皮下经反复传5代形成实体瘤的完整组织块，建立人胃癌裸小鼠原位移植生长和转移模型16个。观察所建立的模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率，常规H-E染色光镜下观察胃癌原位移植瘤、胃癌淋巴结转移和肝转移情况。电镜下观察肿瘤超微结构及免疫组化S-P法检测肿瘤诱导型环氧化酶-2(C0X-2)。结果胃癌裸鼠原位移植块再次原位移植的原位成瘤率达100%(16/

2、16)，淋巴结广泛转移率为87.5%(14/16),肝转移发生率为75.0%(12/16),腹腔积液形成率为12.5%(2/16)。结论原位移植和传移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，具有人胃癌的生物学活性。【关键词】胃肿瘤肿瘤细胞原位移植疾病模型裸小鼠Abstract:ObjectiveTodevelopanudemousemodelofhumangastriccancerthatcanmimicitsnaturalhumanbiologicactivities・MethodsHumangastriccancercelll

3、ineSGC-7901wasculturedinnudemicerepeatedlyfor5generationstogetthesubcutaneoussolidtumor,whichwasthenemu1sifiedandorthotopiclyinplantedintothea.nteriorwallofthestomachinl6nudemice・Thetumorgrowthcharacters,tumor-takerateandmetastaticratewerestudiedgrossly,thetransplan

4、tedtumoranditslymphaticand,byelectronmicroscopy;andCOX-2,byimmunohistochemicalmethod・ResultsThetumor-takeratewaslOO%(16/16),theratesofmetastasistolymphnodesandliverwere87・5%(14/16)and75.0%(12/16)respectively,therateofascitesformationwasl2.5%(2/16)・ConclusionThemodel

5、ofhumanstomachcancerestablishedisqualified,exhibitingnaturalgrowthchara.ctersandbiologicala.ctivities・Keywords:stomachneoplasms;orthotopicthansplantation;diseasemodel;nudemouse既往胃癌动物模型的建立多采用皮下接种方式，虽然这种移植方式简单易行，肿瘤的生长情况也便于观察，且在一定程度上也近似地模拟了原有肿瘤的形态学、生物学及生物化学特性；然而接种于裸小鼠皮

6、下组织毕竟属于异位移植，脱离了其起源组织器官的微环境，因此在实验中移植瘤的某些行为常不同于患者原发恶性肿瘤的生物学行为。如移植瘤常有包膜、局限性生长、很少发生局部或远处器官的转移，故未能很好地被应用于研究人癌潜在的侵袭与转移特性。我们选用低分化胃腺癌细胞系SGC-7901通过裸鼠皮下传5代后再原位移植建立的动物模型局部呈浸润性生长、局部或远处有肿瘤转移，为胃癌的研究提供了一个很好的载体。1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物BALB/C/nu/nu裸小鼠由中科院国家啮齿类上海实验分中心购买，繁育口无特殊致病原（special

7、pathogenfree,SPF）实验动物屏障环境。雌雄兼用，5〜6周，体重（17±2.5）g,分笼饲养（每笼5只）。实验过程中均在SPF屏障环境内饲养。实验前1周购入小鼠，使之适应新环境。1.1.2瘤株人胃腺癌SGC-7901细胞株，由中科院上海细胞生物研究所提供。癌细胞在含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中，于C02恒温孵育箱屮培养，常规传代。1.1.3COX-2羊抗人单克隆抗体及其免疫组化染色试剂盒购自苏州福佑生物技术有限公司。1・2方法1.2.1人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立1.2.1.1皮下移植瘤模型的建

8、立收集体外培养的SGC-7901细胞，使细胞含量为2X1010个几，取0.lml注入裸小鼠颈部皮下形成实体瘤。至肿瘤直径1・5cm左右吋，处死裸小鼠，切取肿瘤放入生理盐水（含105U/L青霉素和105U/L链霉素）中，去除包膜，选择近边缘新鲜组织大约lmni3以粗针穿刺接种于