[精品]弥漫性大B细胞淋巴瘤中Ki-67-Bcl-2蛋白表达的临床意义.doc

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1、弥漫性大B细胞淋巴瘤中Ki-67-Bcl-2蛋白表达的临床意义弥漫性大B细胞淋巴瘤中Ki-67Bcl-2蛋白表达的临床意义【中图分类号IR730.2【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2011)09-0010-02【摘要】弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuselargeB-cel1lymphoma,DLBCL)生发屮心组(GCB)和非生发屮心组(non-GCB)的Ki-67、Be1-2蛋白表达之间可能存在相关性，且这二者都被认为与细胞周期及增殖调控有关，提示二者在肿瘤的发展过程中可能有协同作用。❷【关键词】淋巴瘤；免疫组化；组织微阵列

2、DLBCL是非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's1ymphoma,NHL)中最为常见的组织学类型，在欧美和日本占成人NHL的30%〜40%〈sup〉[l]oDLBCL的形态学、免疫表型、遗传学和临床表现极具异质性。令1材料和方法❷1.1材料选取彭泽县人民医院病理科DLBCL存档蜡块53例，经2位副主任医师重新阅片，明确诊断并排除可能由惰性淋巴瘤转化为DLBCL的病例。存档蜡块全部重新制作HE切片，参照2008年WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类标准，由两位副主任医师对其组织学和免疫表型进行回顾性分析并确诊。另选淋巴结反应性增生标本2

3、0例做对照组。❷1.2方法❷1.2.1DLBCL组织芯片的构建与制备：1•组织芯片模块制做：将熔化石蜡(加入等量的蜂蜡)制作成2.5X2X0.5大小的空白蜡块，设计制作受体蜡块。2、组织芯片的设计和制备：将原蜡块放在45°C温箱中烘5-10inin待蜡块变软，然后，先在显微镜下定位，避开出血坏死区，选取肿瘤组织丰富的区域，用穿刺针从组织块选定部位逐个取出组织芯，放入预先设计的阵列模块中，制成组织芯片。将制成的组织芯片面朝下放在铜板上，于55°C放置30min,轻压模块使组织柱在模块中排平。待冷却后放入72C烤箱中，维持时间1小时，目的是使组织芯与

4、受体蜡块充分融合。3、组织芯片蜡块采用连续切片，切片厚度约4卩ni,用多聚赖氨酸处理过的玻片捞片，置37°C电热恒温箱中烤片过夜，以备实验用。❷1.2.2免疫组化结果判定：CD20、CD79a、CD3、CD10、Bcl-6、MUM-1用来帮助判断肿瘤细胞及明确诊断并进行GCB和non-GCB分组;CD20、CD79a、CD3、CD10、Bcl-2着色部位位于细胞膜,如果有大于30%以上的细胞出现阳性着色记为阳性；Bcl-6.为胞核着色,如果有大于30%以上的细胞出现阳性着色记为阳性；Ki-67着色部位位于胞核，如果有大于50%以上的细胞出现阳性着

5、色，确定为该蛋白阳性。❷1.3统计处理：免疫组化结果采用百分率比较采用X2检验，当样本例数较少时，釆用Fisher确切概率检验；蛋口表达的相关性釆用Spearman相关检验，采用SPSS13.0软件进行统计学处理，以卩〈0.05为差别有统计学意义。❷2结果❷Ki-67在GCB型和non-GCB型表达分别为7和5例，表达率有统计学意义（p二0.036）。在有15例Bcl-6蛋口表达的患者中，有8例患者表达Ki-67,两者之间有统计学意义（P二0・002）oKi-67、Bcl-2与GCB和non-GCB亚组之间的关系见（表1）,Bcl«6蛋白与Ki-

6、67、Bel-2蛋口表达的关系见（表2）,Ki-67蛋口与Bel-2蛋口表达的关系见（表3）o❷表1DLBCLKi-67,Bel-2蛋口表达与GCB和non-GCB亚组的关系DLBCL❷亚组总例数Ki-67表达BCL-2表达阳性阴性P值阳性阴性P值GCB127575non-GCB415360.03622190.775表2Bel-6与Ki-67,Bcl-2表达的相互关系❷Be1-6总例数Ki-67Bel-2阳性阴性rp阳性阴性rp阳性158796阴性384340.4610.00220180.0670.627表3Ki-67与Bel-2表达的相互关系❷

7、Ki-67总例数Bel-2rp阳性阴性阳性1275阴性4122190.0390.7753讨论❷Yuko^[2]报道GCB和non-GCB表达分别为37%(21/57)和63%(36/57例)。Peh^[2]报道GCB和non-GCB表达分别为39.3%(33/84)和60.7%(51/84)。GCB组发病比率比本组试验的比例高。但本组试验的分组情况与国内报道的相似,如徐方平报道GCB比例为24.5%,李义报道GCB比例为21.9%,提示国内的DLBCL大多起源于生发屮心后细胞，可能提示预后更差。❷Ki-67

8、在细胞周期的G、S、G2和M期中表达,Ki-67阳性细胞比率反映了进入细胞周期的增牛:细胞比率，是比较理想的检测细胞增殖活性的抗体。Ki