弥漫性大b细胞淋巴瘤bcl

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1、弥漫性大B细胞淋巴瘤bcl作者：蒋会勇，陈愉，张三泉，朱梅刚，赵彤【关键词】弥漫CorrelationbetentandGCBmolecularsubtypeindiffuselargeBcelllymphoma【Abstract】AIM:ToexplorethecorrelationbetentandgerminalcenterBcelllike(GCB)molecularsubtypeindiffuselargeBcelllymphoma(DLBCL).METHODS:SelfdesignedheminestedPCRentin60casesofDLBCL.Posit

2、ivePCRproductsicroarrayof60specimensofDLBCLmunohistochemicalSPmethod.GCBandnongerminalcenterBcelllike(nonGCB)ethod.SelfdesignedheminestedPCRplify6positivecasesagainandbcl2/IgHgeneentin5casesbycloningandsequencingand1hadthegenesegmentofBAC331191ofhumanchromosome19.CD20entpositivecasesinest

3、edPCRcanimprovethedetectionaccuracyofbcl2/IgHgenerearrangement.Bcl2/IgHgenerearrangementdetectionhelpstheDLBCLdeterminationofGCBsubtypes.【Keyphoma,Bcell,diffuselarge；bcl2;generearrangement【摘要】目的:探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）bcl2/IgH基因重排与分子亚型生发中心样（GCB）的相关性.方法:采用自行设计的半巢式PCR对60例DLBCL的bcl2/IgH基因重排进行了检测

4、，并对阳性产物进行克隆、测序.同时采用免疫组化SP法在组织微阵列上同步观测CD20，CD10，Bcl6，黑色素瘤相关抗原（突变体）1(MUM1)的表达,进行GCB和非生发中心样(nonGCB)分子分类.结果:经常规法扩增bcl2/IgH，有6/60例DLBCLbcl2/IgH阳性；在6例阳性样本中,采用本组设计的半巢式PCR扩增，经克隆及测序证实5例bcl2/IgH基因重排阳性，1例为人类第19号染色体BAC331191基因的片段.60例DLBCLCD20表达全部阳性；CD10，Bcl6，MUM1的阳性表达率分别为43.3%，46.7%，61.7%；GCB32（53.3%

5、）例，nonGCB28（46.7%）例.bcl2/IgH基因重排阳性的病例均属GCB分子亚型,且与CD10表达有显著性相关（P=0.012），而与Bcl6及MUM1表达无相关性.结论:使用本组设计的半巢式PCR可提高bcl2/IgH基因重排检测的准确性.bcl2/IgH基因重排的检测可协助确定部分GCB分子亚型的DLBCL.【关键词】弥漫性大B细胞淋巴瘤；bcl2;基因重排0引言弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuselargeBcelllymphoma,DLBCL）是最常见、高度恶性的非霍奇金淋巴瘤，但新近cDNA芯片的研究结果显示，该瘤存在生发中心样（germinalce

6、nterBcelllike，GCB）和非生发中心样（nongerminalcenterBcelllike,nonGCB）两种分子亚型，GCB的预后明显好于nonGCB类型［1-2］.Hans等［3］以cDNA芯片为参照标准，发现利用“套餐”式免疫标记物CD10，Bcl6，黑色素瘤相关抗原（突变体）1［melanomaassociatedantigen(mutated)1,MUM1］也可以对DLBCL进行分子分类.bcl2/IgH基因重排是人类恶性淋巴瘤最常见的染色体异常，存在bcl2基因重排的病例有较好的生存率.我们利用组织微阵列(tissuemicroarray,TMA

7、)技术对60例DLBCL进行分子分类,采用PCR技术检测bcl2/IgH基因重排，探究bcl2/IgH基因重排与分子亚型的相关性，旨在为临床判断DLBCL的预后提供更多的信息.1材料和方法1．1材料1999/2003年诊断明确资料齐全的DLBCL60（男29，女31）例，中位年龄53.3（16~91）岁，所有标本均为40g/L中性甲醛固定,常规石蜡切片HE染色.由3名专门从事淋巴瘤研究的医师按新的axim公司；CD10购于美国Zymed公司；Bcl6购于美国Neomarker公司；MUM1mAb由意大利Perugia大学血液病