伊红美蓝培养基.doc

《伊红美蓝培养基.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、伊红美蓝培养基—*、原理伊红美蓝培养基(eosirnmethylenebluemedium,简称EMBmedium),一-般用于检测人肠杆菌。停吆「丸醪样型feL美缺1/碱样型feL半去肠杆菌分解k糖芳酸吋细菌带糸电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。蛋白腺提供碳源和氮源；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是缓冲剂；琼脂是培养基凝固剂；伊红和美篮是抑菌剂和pH指示剂，可抑制G+,在酸性条件下产生沉淀，形成紫黑色菌落或具黑色屮心的外围无色透明的菌落。二、鉴定方法%1制作伊红美蓝培

2、养基，趁热注入培养皿屮，凝成平板，待用。%1用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按1：10稀释。%1取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。%1将划线后的培养皿倒置37°C温箱中培养18〜24小时。培养基屮会出现大肠杆菌菌落，菌落小心呈暗紫黑色，发金属光泽。%1将菌落接种于斜面培养基上(由营养琼脂培养基制成)。三、配方蛋白腺log乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂15g蒸懈水1000ml2%伊红水溶液20ml0.5%美蓝水溶液13ml四、储备培养基的制备先将琼脂加至900ml蒸倔水，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白豚，

3、混匀使之溶解，再以蒸锚水补足至1000ml,调整PH为7.2〜74。趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高床蒸汽灭菌器内以115C灭菌20min,贮存于冷暗处备用。五、制法将蛋白豚、磷酸盐和琼脂溶解于蒸镭水屮，校正PH,分装于烧瓶内，121°C高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50〜55°C,加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。