紫外可见分光光度法绘制Fe标准曲线.doc

《紫外可见分光光度法绘制Fe标准曲线.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、泸州医学院公共卫生实验教学中心《卫生化学》实验报告专业预防医学班级1班姓名杨秀程第2次实验实验日期2013年4月1日地点实验室指导教师谢老师实验题目：紫外可见分光光度法绘制Fe标准曲线预习情况：一、实验目的与要求：掌握紫外可见分光光度法分析条件选择的方法；熟悉紫外可见分光光度计的使用方法；了解用邻二氮菲测定微量Fe的原理。二、实验原理：邻二氮菲是测定微量Fe的一种优良显色剂。在pH=3-9的溶液中，邻二氮菲与二价Fe作用生成橙红色配合物，其lgK=21.3,最大吸收波长为510nm,摩尔吸光系数为1.1×10^4.在一定范围内，二价Fe的浓度与吸光度符合比尔定律

2、。三、仪器与试剂1.仪器与器皿紫外分光光度计，25ml容量瓶，胶头滴管，1ml移液管2.试剂1.000×10^-3mol/L铁标准溶液，1.5g/L邻二氮菲,100g/L盐酸羟胺溶液，1mol/L醋酸钠溶液，去离子水。四、实验步骤：1.配液取6个25ml容量瓶，分别加人0.00，0.20,0.40,0.60,0.80,1.001.000×10^-3mol/L铁标准溶液,0.5ml100g/L盐酸羟胺溶液,摇匀后，再分别加入1.00ml1.5g/L邻二氮菲,2.50ml1mol/L醋酸钠溶液,用去离子水定容至刻度，摇匀。2.吸收曲线绘制用最大浓度配置的溶液到入吸收

3、池，在分光光度计上从波长440nm到560nm每隔5nm测量一次吸光度，在最大吸收波长附近每隔2nm测量一次吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线。从曲线上找出最大吸收波长。3.标准曲线绘制以试剂空白为参比溶液，在选定的最大吸收波长下测量各溶液的吸光度。绘制出标准曲线，求出线性回归方程和相关系数。五、实验数据及结果：最大吸收波长：λmax=509.75标准曲线：回归曲线方程：Y=87.14458X+0.0199R=0.99927六、讨论：紫外可见依然需要分为两步，先是光谱测定，确定最大吸收波长，然后再是光度的测定，在实验中不仅要规范操作，更要谨慎

4、，这样才能保证R的值！