紫外-可见分光光度法标准操作规程

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1、紫外-可见分光光度法标准操作规程1编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（二部）2 定义：紫外可见分光光度法是基于被测物质在紫外光区、可见光区的电磁辐射的选择性吸收现象，对该物质进行定性或定量分析的方法。3 原理：紫外可见分光光度法是分子与原子外层电子能级跃迁对辐射的吸收，属于分子吸收光谱法。4适用范围：凡具有芳香环或共轭双键结构的有机物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。5检验操作方法5.1 仪器及用具紫外-可见分光光度计吸收池擦镜纸5.2 操作方法5.2.1 准备

2、5.2.1.1 根据测量的波段范围，选择适当光源（195～360nm用氘灯，360～800nm用钨灯）。5.2.1.2 选择合适的波长5.2.1.3 根据测量的波段范围，选择合适的比色皿（195～350nm用石英比色皿，350～800nm用石英比色皿或玻璃比色皿）。5.2.1.4　打开试样室盖5.2.1.5　开启电源5.2.1.6 仪器预热30分钟5.2.2 按各品种项下的规定，配制对照品溶液和供试品溶液，所用的空白，除另有规定外，系指同体积的溶剂代替对照品溶液或供试品溶液，并用相同方法处理。5.2.3 测量吸光

3、度A5.2.3.1 按MODE键，使A指示灯亮。5.2.3.2 打开试样室盖，观察暗电流，若不为零，则清除。5.2.3.3 将参比溶液放入1#试样槽，待测溶液等放入其他槽。5.2.3.4 关闭试样室盖，使1#槽进入光路，调节100%T/OA手轮，使显示屏读数为“100.0”。5.2.3.5 拉动拉杆，使待测溶液进入光路，显示屏读数为待测溶液吸光度A值，记录数据。6 注意事项6.1 除另有规定外，测定时应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，并在规定的吸收峰波长±2nm以内处再测几个点的吸收

4、度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。6.2 一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。6.3 按测定波长选用吸收池（石英或玻璃），使用前用擦镜纸擦净透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨损），取吸收池时，拿毛玻璃的两面，使用后及时用水或测定溶剂冲洗干净，晾干后，防尘保存。6.4 所用吸收池，使用前应先配对试验并用被测溶液冲洗2～3次，以保证被测溶液浓度不变。6.5 测定时，应取对照品平行操作，使所用试剂用量、反应温度、酸碱度、反应时间等完全一致，对随时间变化影响显色的品种应准确控制读数时间，操

5、作时应注意避光。给分标准：根据样品选择合适的波长（10分）使用前进行机器的预热（10分）挑选合适的比色皿（10分）配制合适的空白溶液与样品、准备擦镜纸（10分）测定前打开调零，关闭调100%（10分）是否进行玻璃杯的校正（10分）测定样品（10分）平行操作（10分）测定结果（10分）测定后清理台面（10分）