微生物菌液工业发酵工艺研究.pdf

微生物菌液工业发酵工艺研究.pdf

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1、工艺管理微生物菌液工业发酵工艺研究卢灵珍王新亮郝春雷中国石化河南油田分公司石油工程技术研究院河南郑州450046摘要:比较不同培养基对菌种繁殖和代谢表活剂的影响,以根据培养基对菌种的培养效果,对于降粘菌和防蜡菌来说,及各培养基的成本,确定ZY培养基为降粘菌和防蜡菌的发酵培无论是复合菌还是单菌,除ZD培养基稍差以外,菌种以其它三种养基。以初试发酵罐进行发酵模拟实验,确定发酵罐工作参数培养基进行发酵时的繁殖、代谢表活剂能力,彼此相差不大。因为:40℃、pH值6~8、发酵时间72h。以初试发酵罐参数为参考进此,主要通过比较培养基成本来进行培养基优化。比较成本,选行工业发酵,

2、发酵后菌液中菌体浓度为2~4×108个/mL,降粘菌择ZY培养基为降粘复合菌及防蜡复合菌菌种的发酵培养基。降粘率和防蜡菌防蜡率分别为63.6%和69.7%。证实工业发酵成(2)发酵搅拌转速影响研究功,可进行现场应用试验。结果可见,搅拌转速对降粘菌和防蜡菌发酵影响规律相近,关键词:微生物降粘;微生物防蜡;发酵工艺都是在发酵罐搅拌转速高于400rpm时差别不大;当转速降至200rpm时,菌体浓度有所下降,但同最高菌体浓度相差不到30%,微生物采油技术,是指利用微生物产生有用的代谢产物或者远小于一个数量级。因此发酵罐搅拌转速对菌液发酵影响不利用微生物能够分解碳氢化合物的性能

3、,促进原油开采的技术。明显。该项技术以适应性强、作业简单、对油层无伤害等优势,已经引起4.发酵时间的确定世界各国的普遍重视[1-3]。降粘菌和防蜡菌规律相似。0-24h时为菌种发酵对数生长微生物菌种进入现场应用前,需应用发酵工艺进行工业发酵期,在24h~48h,pH值和表面张力持续下降;到48h~72h,发酵基生产。可在实验室进行发酵初试研究,再以得到的发酵参数为参本稳定,表面张力达到最低,pH值上升;到96h,菌浓已开始下降,考进行工业发酵生产。工业发酵完成后检测菌液指标,验证发酵进入衰败期。如单纯考虑菌体浓度,则发酵48h~72h比较合适。效果。工业发酵时由于罐体

4、更大,装液量更多,会导致发酵速度更慢,所一、实验材料与方法以选择72h为工业发酵时间。1.实验材料[4]5.工业发酵产品性能检测LB培养基,ZJ培养基,ZY培养基,ZD培养基。为便于操作,三级发酵时间温度均为40℃,pH6~8,时间统一降粘和防蜡菌种均为实验室已筛选出的菌种。设定为72h。一级发酵搅拌频率为200rpm,二级发酵120rpm,三实验原油为河南油田南部陡坡带泌304区块赵安4005井级发酵100方/h。原油。以河南油田南部陡坡带泌304H1段稠油检测发酵菌液的降2.实验方法粘率;以H2段高凝油检测发酵菌液防蜡率。结果表明降粘菌菌(1)发酵培养基优化体浓度

5、为3.7×108个/mL,防蜡菌菌体浓度为2.3×108个/mL,降粘查阅文献,确定LB、ZJ、ZY、ZD为备选培养基,分别接种各菌菌降粘率为63.6%,防蜡菌防蜡率为69.7%。种母液,检测菌体浓度并检测表面张力,以确定发酵培养基。再结论比较各培养基成本,选择价格相对低廉的培养基。比较不同培养基对菌种繁殖和代谢表活剂的影响,以及各培(2)发酵搅拌转速影响研究养基的成本,确定ZY培养基为降粘菌和防蜡菌的发酵培养基。配制ZY培养基,装入初试发酵罐。设定培养温度和pH值范以初试发酵罐进行发酵模拟实验,确定发酵罐工作参数为:40℃、围,分别接入降粘复合菌和防蜡复合菌菌种母液

6、,以不同搅拌转pH值6~8、发酵时间72h。速培养菌种。培养结束后以平板法检测细菌浓度。以初试发酵罐参数为参考进行工业发酵,发酵后菌液中菌体(3)发酵时间的确定浓度为2-4×108个/mL,降粘菌降粘率和防蜡菌防蜡率分别为检测降粘复合菌、防蜡复合菌不同发酵时间的菌浓、表面张63.6%和69.7%。证实工业发酵成功,可进行现场应用试验。力以及pH值变化,判断菌种不同发酵阶段的时间。参考文献:3.实验结果与分析[1]赵寿增.微生物采油技术[J].油气采收率技术,1996,3:14.(1)发酵培养基优化[2]李习武,刘志培.石油烃类的微生物降解[J].微生物学报,分别以LB

7、培养基、ZJ培养基、ZY培养基、ZD培养基作为培2002,42:764.养基,菌种浓度以109个/mL计,表面张力以mN/m计,降粘复合[3]石勇,姜兰,雷琦.微生物防蜡技术的研究与应用[J],化学工菌的菌种浓度为1.385、1.581、1.381、1.184,表面张力为29.84、业与工程技术,2009,30:17.28.68、28.79、31.61;防蜡复合菌的菌种浓度为1.875、1.685、1.725、[4]郝春雷,常国栋,王新亮等.诱变后抗高温防蜡菌的性能评1.253,表面张力为32.57、32.31、32.25、34.85;sx的菌种浓度

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