微生物油脂发酵工艺的研究

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1、南京工业大学硕士学位论文微生物油脂发酵工艺的研究姓名：刘全振申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：熊晓辉200806摘要本文利用高产油脂的菌株3．3410和M80摇瓶发酵生产微生物油脂，以提高油脂产量为目的，研究了发酵培养基组成和发酵条件对两菌株产油的影响，对摇瓶发酵得到的微生物油脂成分进行了检测，同时对微生物油脂发酵生产生物柴油的综合利用进行了分析。论文的主要工作及结论有：1．通过产油发酵能力的初筛，在六种产油微生物菌株中，以3．3410和M80的油脂产量为最高。2．发酵条件的优化(1)本论文采用单因素的实验方法确定发酵培养基的碳源、氮源分别

2、为葡萄糖和由酵母膏、蛋白胨、硫酸铵组成的复合氮源。(2)3．3410和M80的发酵条件一致，最佳发酵条件组合为装液量100mU500mL、摇床转速180r／mill、初始pH5．8．6．O、培养温度28℃，培养时间96小时。(3)对两菌株产油发酵有显著影响的因素有碳源浓度、氮源浓度和NaAc浓度，采用中心复合设计实验对培养基中的这三种成分进行了响应面分析，结果表明，对于3．3410最佳培养基配方为葡萄糖88g／L，酵母膏2．Og／L，蛋白胨1．Og／L，硫酸铵1．Og／L，NaAc6．0g／L，KH2P041．Og／L，MgS04·7H200．3g

3、／L。预测总油脂产量为8．8叽，验证实验中实际摇瓶油脂产量为8．5g／L；对于M80最优培养基组成为：葡萄糖80g／L，酵母膏2．Og／L，蛋白胨1．0g／L，硫酸铵1．0g／L，NaAc6．0g／L，KH2P041．0g／L，MgS04·7H200．3g／L。预测总油脂产量为12．8g厂L，验证实验中实际摇瓶产量为11．7g／L。3．油脂成分测定通过GC．MS对3．3410和M80两菌株油脂成分的分析表明，两菌种的油脂主要是16和18个碳原子的脂肪酸，和植物油链长相似，接近石化柴油15个碳原子的链长。两菌株油脂中不饱和脂肪酸含量较高。3．3410

4、和M80油脂中不饱和脂肪酸的含量分别占各自油脂总量的62．7％和67．9％。4．菌体残渣粗蛋白的测定通过凯氏定氮法对提取油脂后的菌体残渣进行了粗蛋白的测定，结果表明，3．3410和M80粗蛋白的含量分别占菌体残渣总量的33．3％和26．9％。5．微生物油脂生产综合利用的分析表明，微生物油脂发酵具备综合利用的潜力，具有重要的经济和社会价值。关键词。微生物油脂培养基优化综合利用IIABSTRACTThethesisisaboutfl弱k．shal(erfIe肌entationofmicrobiallipidproductionusing3．34lO锄d

5、M80．Studiesonthenutritional锄denvir0唧emalrequirementsforoilproductionwerecarriedout．mou曲GC．MSdetectedmein留edientofthelipidTheanalysistothemicrobiallipidfe彻entation’scomprehensiveutilizationw弱studiedalso．Themainworksandconclusions龇．easfollowed：1．nehighestmicrobiallipid0utputills

6、i)(s仃ainsis3．341O锄dM802．Fe九nentationconditionoptimized：(1)Thecarbonsollrce跚dnitrogensourceareiInponanttooilfement．(2)Througllsinglefactormethod，glucoseandCompoundni们gensourceareconfi肌ed弱carbonsource锄dni艄ogensourcerespectiVely．(3)nencen仃alcomplexdesi印metllodw勰印pliedfortheopt妇iz

7、ationofcul咖lmedi哪．nw弱showedmatmeprimefe咖entationmediumcontaillto3．34lO：glucose88g／L，ye弱tex仃act2．0g，L，peptone1．O∥L，(NH4)S041．0∥L，NaAc6．0g，L，KH2P041．Og／L，MgS04‘7H200．3g／L。AccordiIlgtot11eopthizedmedium，也eyieldincre弱edt08．5g，L．TheDrimefe玎nentationmediumcontaillt0M80：glucose80g／L，

8、ye弱tex们ct2．0g，L，peptone1．Og／L，(N心)S041．0g／L，NaAc6．Og／L，KH2P04