高产油脂酵母的选育及发酵工艺的研究

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1、浙江大学硕士学位论文中文摘要油脂既是构成和维持生命运动的基本物质之一，也是重要的工业原料．目前，随着人口的日益增长，油脂供求矛盾日益尖锐，动植物油脂已经不能满足人类的需求．微生物油脂是继动植物油脂后开发的一种新油脂资源。大多数微生物油脂富含可以降低血清胆固醇的不饱和脂肪酸，具有促进人类健康的重要作用，同时也可以作为生物柴油生产的油脂原料。微生物油脂的开发利用可以缓解动植物油脂资源紧缺的局面，为油脂资源的获得提供了一条新的途径。本试验对比了真菌油脂抽提的几种方法，确定了酸热法作为油脂抽提的方法；通过对十六株酵母菌产油能力的比较研究，筛选到了一株产油脂的优良菌株：子囊菌油

2、脂酵母(Lipomycestelrasporus)Y11562。以Yll562为出发菌株，采用紫外线诱变的方法，获得了一株油脂高产菌株将其命名为UV5。该突变菌株经过摇瓶培养96h后，生物量可达21．77-4-0．33(g／L发酵液)，油脂含量达到8．07士0．20(g／L发酵液)，油脂得率达到37．05+0．35％(g／g菌体干重)，均比出发菌株有明显的提高。该菌株连续传代二十次后，其油脂得率保持稳定。因此，突变菌株UV5是一株具有工业生产潜力的油脂生产菌株。通过单因素试验确定了突变菌株UV5的发酵条件为：碳源为葡萄糖709／L，氮源为硫酸铵0．59／L，碳氮比为3

3、08，初始pH为6．5，接种量为10％，培养温度为28。C，培养时间为96h，油脂含量达到9．09士0．14(g／I．发酵液)，油脂得率达到53士0．23％(g／g菌体干重)．用响应面试验设计的方法对UV5进行了发酵培养基优化，确定了Uv5的最佳发酵培养基组成为：葡萄糖浓度为129．369／L、硫酸铵浓度为0．779／L、酵母粉浓度为2．0679／L，磷酸二氢钾浓度为1．Og／L、硫酸镁浓度为0．59／L。在以上条件下，理论最大油脂得率可达58．42％(g／g菌体干重)。经过验证试验，实际油脂得率达到57．90-a：O．50％(g／g菌体干重)，预测值-9实测值之间有

4、良好的拟合性，模型是有效的，对应的生物量为30．47+0．34(g／L发酵液)，发酵液含油量17．644-0．35(g／L发酵液)。菌株优化培养基中的油脂得率比原培养基提高了64．89％。关键词：子囊菌油脂酵母，油脂，诱变，发酵，响应面实验设计¨I浙江大学硕士学位论文AbstractAbstraetLipidisoneofthebasicmaterialandlife·sustainingactivities，aswellasoneimportantindustrial．Atpresent，animalandvegetableoilCannotmeet谢ththede

5、mandsofpeoplenowadaysbythedevelopmentofpopulation．Microbialoilisanewkindofresourcesafteranimalandvegetableoil．Alotofmicrobialoilisrichinpolyunsaturatedfattyacidswhichcanlowertheserumcholester01．Sotheyplayanimportantroleinthehealthofhumanbeing，whicharcalsorawmaterialsofthebiodieselproduc

6、tion．TheexploitationofmicrobialoilCaneasethesituationofshortageofanimalandvegetableoilresource．Therefore，thedevelopmentandutilizationofmicrobialoilshavethepracticalsignificancefortheedibleoilandbiodiesel．MicrobialoilsprovideanewwayoftheoilreSOurCeS．Thepaperisbasedonthesepoints，researche

7、dtheextractionmethods，andidentifiedacid-heatingextractionastheextractionmethods．Comparedtheoilproductiveabilityofsixteenyeasts，anddeterminedtheLipomycestetrasporusY1562asthebestoilproductionstrain．Toimprovetheproductionofoil，LipomycestetrasporusY1562wasmutatedbyUVtreatment．Muta