西瓜玉米黄质环氧化酶基因及启动子的克隆与分析.pdf

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1、分类号：密级：S65l单位代码：学号：100862008304西瓜玉米黄质环氧化酶基因及启动子的克隆与分析CloningandAnalysisofZeaxanthinEpoxidasegeneanditspromoterinWatermelon学位申请人：指导教师：学科专业：学位类别：授予单位：答辩日期：张爱华段会军教授作物遗传育种农学硕士河北农业大学二。一一年五月二十九日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研

2、究成果，也不包含为获得塑兰堡窒些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦壅些态堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑皇垦壅些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：导师

3、签名：签字同期：年月日签字日期：功J／年／月／日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：本文所用缩略词及其意义Theabbreviativewordsandcorrespondingmeaningsinthethesis英文缩写ShortforwordsAmpATPBLASTCDSCDNADEPCDMSOdNTPDTTEBEDTAESTGSPIPTGkDaLBI—PCRP．PCRTAIL．PCRADNCBIOI心PCRRACERT．PCRSDSTA正UTRX-gal英文全名及拉丁文名Thefullspellingofthe

4、words／LatinAmpicillinAdenosinetriphosphateBasiclocalalignmentsearchtoolCodingsequenceComplementaryDNADiethylpyrocarbonateDimethylsulphoxideDeoxyribonucleosidetriphosphateDL-dithiothreitolEthidiumbromideEthylenediaminetetraaceticacidExpressedsequencetagGenespecificprimerIs

5、opropyl—B—D—thiogalactopyranosideKilodaltonsLuria-bertanimediuminverse-PCRpanhandle．PCRThermalasymmetricinterlacedpolymerasechainreactionArbitrarydegenerateprimerNationalCenterforBiotechnologyInformationOpenreadingframePolymerasechainreactionRapidamplificationofeDNAendsRe

6、versetranscription-polymerasechainreactionSodiumdodecylsulphateTris．acetate．ED弼bufferUntranslatingregion5-bromo-4-chloro·-3-．indolyl-·13-D-galactoside中文名Themeaningsofwords氨苄青霉素三磷酸腺苷基本的局部序列联配搜索工具编码区序列互补DNA焦碳酸二乙酯二甲基亚砜脱氧核糖核营三磷酸二硫苏糖醇溴化乙锭乙二胺四乙酸表达序列标签基因特异引物异丙基．13．D硫代半乳糖苷千道尔顿LB培

7、养基反向PCR锅柄式PCR热不对称交错PCR随机筒并引物美国国家生物信息中心开放阅读框聚合酶链式反应eDNA末端快速扩增基因全长反转录聚合酶链式反应法十二烷基磺酸钠Tris．乙酸缓冲液非翻译区5．溴4氯．3．吲哚-p-D-半乳糖苷帅7㈣8Ⅲ2Ⅲ7㈣9㈣8Ⅲ⋯j■I舢Y摘要叶黄素循环存在于所有的高等植物中，是植物在长期进化过程中所保存下来的一种代谢过程，其中依赖于叶黄素循环的热耗散是最主要的功能，玉米黄质环氧化酶基因编码的蛋白是该循环的两个关键酶之一。本研究利用RT-PCR技术克隆了西瓜玉米黄质环氧化酶基因CIZE，并对其进行了生物信息学分

8、析。在此基础上，利用genomewalking克隆了该基因的启动子。研究结果如下：1．通过RT-PCR获得CIZE基因的eDNA保守区片段，采用RACE技术获得了西瓜CIZE基因cDNA全长序